[发明专利]一种硒化海藻酸钠与硒化壳聚糖包覆的益生菌双层微胶囊、制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种硒化海藻酸钠与硒化壳聚糖包覆的益生菌双层微胶囊、制备方法及其应用，本发明的制备方法包括以下步骤：用亚硒酸钠处理海藻酸钠与壳聚糖制得硒化海藻酸钠与硒化壳聚糖；用硒化海藻酸钠与硒化壳聚糖包埋益生菌；使用Ca²⁺交联，获得益生菌双层微胶囊。本发明既能发挥益生菌定殖的作用，改善肠道微生态，又能补充人体必需的硒元素，提高机体免疫力，进一步强化了益生菌对人体的增益效果。

技术领域

本发明属于医药生物技术领域，特别涉及一种硒化海藻酸钠与硒化壳聚糖包覆的益生菌双层微胶囊、制备方法及其应用。

背景技术

益生菌是通过定殖作用改变宿主某一部位菌群的组成，从而产生有利于宿主健康作用的单一或组成明确的混合微生物。肠道作为人体微生物菌群丰度最高的器官，适当补充益生菌，可改善肠道功能，对维持人体健康有积极意义。然而，人体消化道存在胃酸、胆盐等消化液，有强烈的抑菌杀菌作用，这给口服益生菌的定殖造成巨大障碍。

海藻酸钠是一种藻源性海洋多糖，分子表面存在很多羧酸根离子，带负电，有良好的耐酸性，可保持所负载的药物在经过胃部时活性不受影响。壳聚糖是具有阳离子电荷的几丁质的脱乙酰化衍生物，除良好的生物相容性和生物降解性外，还具有良好的生物黏附性，有助于载药微胶囊靶向达到肠道。中国发明专利201310337653.4公开了一种壁材为海藻酸钠与壳聚糖的可悬浮乳酸杆菌湿胶囊的制备方法，具有低耗能等特点。中国发明专利200610070563.3利用海藻酸钠与氯化钙发生离子交换形成海藻酸钙包被,再利用海藻酸钙与壳聚糖等电点不同使壳聚糖在海藻酸钙表面形成二次包被,低温冷冻干燥后制成多层包被益生菌微胶囊。两个专利的方法皆有效提高了益生菌的活性。

硒是人体必需的微量元素，有增强免疫力的功效，已被广泛用于保健食品、辅助治疗制剂等领域。联合多糖有机硒与益生菌，将有望提高益生菌改善肠道微生态的效果。

然而，肠道微生态的改善是一个复杂系统的工程，除益生菌定植外，往往需要添加功能分子、增强免疫力等辅助手段，以起到协同效果。目前公开的益生菌包覆物及其制剂并无此功能。因此研究出一种硒化海藻酸钠与硒化壳聚糖包覆的益生菌双层微胶囊成为当前亟待解决的问题。

发明内容

本发明的首要目的在于提供一种硒化海藻酸钠与硒化壳聚糖包覆的益生菌双层微胶囊。

本发明另一目的在于提供上述双层微胶囊制备方法。

本发明再一目的在于提供上述双层微胶囊应用。

本发明所采取的技术方案是：

一种双层微胶囊，包括硒化海藻酸钠、硒化壳聚糖和益生菌。

进一步的，所述的益生菌为嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、乳双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、双歧杆菌、短乳杆菌、植物乳杆菌。

上述所述的双层微胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将亚硒酸钠缓慢加入到海藻酸钠，过滤取滤液，加乙醇醇析，抽滤烘干得硒化海藻酸钠；

1)将亚硒酸钠缓慢加入到壳聚糖，过滤取滤液，加乙醇醇析，抽滤烘干得硒化壳聚糖；

2)将硒化海藻酸钠和硒化壳聚糖灭菌并充氮除氧，制得无菌硒化海藻酸钠以及无菌硒化壳聚糖；

3)将益生菌用PBS缓冲液重悬、离心、取菌体；再用PBS缓冲液重悬得菌悬液；

4)将步骤4)制得的菌悬液与步骤3)的无菌硒化海藻酸钠按体积比为1：(2～10)混合均匀，得海藻酸钠菌悬液；

5)将海藻酸钠菌悬液与步骤3)的无菌硒化壳聚糖溶液按体积比为1：(1～5)混合得到海藻酸钠壳聚糖混合菌悬液；

6)将海藻酸钠壳聚糖混合菌悬液滴到2～5％的无菌氯化钙，静置得包覆益生菌的双层微胶囊。