[发明专利]一种解淀粉芽孢杆菌抗G-细菌抗菌肽及其发酵生产方法

说明书

本发明公开了一种解淀粉芽孢杆菌抗G‑细菌抗菌肽及其发酵生产方法，按质量份数计算，其组成和含量如下：酵母膏0.1‑0.3％；L‑谷氨酸0.3‑0.5％；葡萄糖1.4‑2.4％；七水硫酸镁0.005‑0.1％；氯化钾0.05‑0.1％；磷酸二氢钾0.1‑0.2％；五水硫酸铜0.00016‑0.0003％；七水硫酸亚铁0.00015‑0.0002％；硫酸锰0.005‑0.007％；水96.3925％‑97％。本发明提供的抗菌肽发酵方法所制备的抗菌肽液态抑大肠杆菌菌圈直径可以达到12.4mm效价可以达到24590u/ml，同时丰富了细菌抗菌肽种类，通过本发明提供的发酵生产方法得到的抗菌肽产品具有较好的抑菌活性。

技术领域

本发明涉及微生物制剂领域，尤其涉及一种解淀粉芽孢杆菌抗G-细菌抗菌肽及其发酵生产方法。

背景技术

随着社会的发展和人们的生活水平提高，更多的人越来越关心食物的安全和健康问题，无污染、无残留和无公害的绿色安全食品已逐步成为人们一种新的消费追求。饲料添加剂是生产饲料的源头之一，其质量直接影响饲料的质量，而饲料的质量又直接影响到畜禽的质量，所以要生产出绿色安全的畜禽产品，就必须严把饲料添加剂的质量和安全关。目前，所有的常规抗生素都出现了相应的抗药性致病株系，致病菌的抗药性问题已经日益严重地威胁着人们的健康。随着抗生素的大量广泛用于饲料中和人们对食品和环境质量的要求越来越高，人们对抗生素的副作用认识日益加深，抗生素在饲料业中的应用，已面临着全面淘汰或禁用的局面。

抗菌肽具有多种功效，可替代对人类健康有危害的抗生素和抗菌类药物在饲料中添加，是理想的无毒、无残留、高效广谱、抗菌，促生长的绿色饲料添加剂，被认为是抗生素的理想替代品。近年研究表明，解淀粉芽孢杆菌可改善动物肠道菌群的平衡，抑制病原菌的生长，增强动物机体免疫力，提高动物消化功能，促进动物生长发育和提高动物生产性能等益生作用，解淀粉芽孢杆菌产抗菌蛋白脂肽类和各种消化酶，具有一般乳酸菌维持肠道微生态平衡，刺激免疫，提高动物消化功能等益生作用，还具有抗菌肽抑制病原菌生长的能力。尤其在抑制G-细菌如大肠杆菌，沙门氏菌等上表现优越。使其必将成为饲料添加剂行业中不可替代重要成员。

故如何将饲料中对人类健康有危害的抗生素和抗菌类药物替换成具有高抑菌性能的抗菌肽成为本领域技术人员亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明为制备具有高抑菌性能，且能提高动物消化功能的抗菌肽，提供了解淀粉芽孢杆菌抗G-细菌抗菌肽的发酵生产方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明的第一个方面是提供了一种解淀粉芽孢杆菌抗G-细菌抗菌肽的发酵生产方法，包括以下步骤：

步骤1、将原料混合制备的混合液进行pH调节，并将所述混合液的pH值控制在7-9，pH调节后对所述混合液进行培养基灭菌处理；

步骤2、将种子液按1-4％的接种量接种于步骤1中得到的所述混合液以进行发酵培养，所述发酵培养的条件为：温度32-42℃，搅拌速度100-200rpm，并发酵培养16-32h，得到发酵液；

步骤3、将步骤2中得到的所述发酵液置入离心机进行离心分离5-20min，离心分离后通过微孔滤膜过滤所述发酵液的上层清液，得到的滤液即为抗菌肽制品；

其中，按质量份数计，步骤1中所述混合液的各组成及其用量如下

进一步地，步骤2中的所述种子液的制备方法包括以下步骤：

步骤21、将原料混合得到混合液并对所述混合液进行pH调节至7.0-7.2；

步骤22、对调节pH后的所述混合液进行灭菌处理，灭菌处理时间为10-40min；