[发明专利]一种草坪草种子组培外植体消毒的方法有效
| 申请号： | 201811649551.5 | 申请日： | 2018-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN109644870B | 公开（公告）日： | 2022-09-23 |
| 发明（设计）人： | 刘松虎;王志勇;刘磊;李蒙;任毛飞;夏维丽;王磊鹏 | 申请（专利权）人： | 信阳农林学院 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 上海段和段律师事务所 31334 | 代理人： | 李佳俊;郭国中 |
| 地址： | 464000 河南省信阳*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 草坪 种子 组培外植体 消毒 方法 | ||
1.一种草坪草种子组培外植体消毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、选取需进行愈伤组织诱导的草坪草种子，将其加入浓硫酸中进行振荡处理，去除颖壳；
B、将去除颖壳的草坪草种子取出，置于水中，反复清洗残留的酸液；
C、将经B处理后的草坪草种子进行灭菌处理，然后清洗得无菌草坪草种子用于接种；
所述草坪草种子为早熟禾草坪草种子；
步骤A中，所述振荡时间为10-15秒，振荡幅度15-20mm，振荡频率为80-100/min；
步骤A中，所述浓硫酸与草坪草种子的体积比为1:1.3；
步骤A中，所述浓硫酸的质量浓度为1.6g/ml。
2.根据权利要求1所述的草坪草种子组培外植体消毒的方法，其特征在于，步骤B中，所述水的体积为浓硫酸体积的10-15倍。
3.根据权利要求1所述的草坪草种子组培外植体消毒的方法，其特征在于，步骤B中，所述反复清洗的次数为5-6次。
4.根据权利要求1所述的草坪草种子组培外植体消毒的方法，其特征在于，步骤C中，所述灭菌处理在超净工作台上进行；所述清洗采用高压灭菌处理过的无菌水。
5.根据权利要求1所述的草坪草种子组培外植体消毒的方法，其特征在于，步骤C中，所述灭菌处理具体步骤如下：先将草坪草种子用酒精处理2min、然后用HgCl2处理10min。
6.根据权利要求5所述的草坪草种子组培外植体消毒的方法，其特征在于，所述酒精的质量浓度为70%；HgCl2的质量浓度为0.1%。
7.根据权利要求1所述的草坪草种子组培外植体消毒的方法，其特征在于，步骤C中，所述清洗次数为6次。
8.一种草坪草种子组培外植体消毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、选取需进行愈伤组织诱导的草坪草种子，将其加入浓硫酸中进行振荡处理，去除颖壳；
B、将去除颖壳的草坪草种子取出，置于水中，反复清洗残留的酸液；
C、将经B处理后的草坪草种子进行灭菌处理，然后清洗得无菌草坪草种子用于接种；
所述草坪草种子为剪股颖草坪草种子；
步骤A中，所述振荡时间为10-15秒，振荡幅度15-20mm，振荡频率为80-100/min；
步骤A中，所述浓硫酸与草坪草种子的体积比为1:1.5；
步骤A中，所述浓硫酸的质量浓度为1.7g/ml；
步骤C中，所述灭菌处理具体步骤如下：先将草坪草种子用酒精处理1.5min、然后用HgCl2处理8min；
所述酒精的质量浓度为75%；HgCl2的质量浓度为0.1%；
步骤C中，所述清洗的次数为6次。
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