[发明专利]产生肝巨噬细胞的方法及其用途

权利要求书

1.一种从单核细胞衍生肝巨噬细胞的方法，其包括在肝巨噬细胞培养基中培养单核细胞，其中所述肝巨噬细胞培养基包含条件培养基和基础培养基，其中所述条件培养基通过以下方法获得，所述方法包括：

(a)在细胞外基质存在下，在无血清细胞培养基中培养肝细胞1至7天；和

(b)在(a)中的培养过程结束时分离上清液。

2.一种从多能干细胞衍生肝巨噬细胞的方法，其包括：

(a)培养多能干细胞以获得单核细胞；和

(b)在肝巨噬细胞培养基中培养来自(a)的单核细胞，其中所述肝巨噬细胞培养基包含条件培养基和基础培养基，其中所述条件培养基通过以下方法获得，所述方法包括：

(i)在细胞外基质存在下，在无血清细胞培养基中培养肝细胞1至7天；和

(ii)在(i)中的培养过程结束时分离上清液。

3.根据权利要求2所述的方法，其中培养多能干细胞还包括：

(i)培养多能干细胞以获得胚状体；和

(ii)分化胚状体以获得单核细胞。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其中所述多能干细胞是经诱导的多能干细胞。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述基础培养基是低血清基础培养基。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在肝巨噬细胞培养基中培养单核细胞包括在不存在细胞外基质的情况下在所述肝巨噬细胞培养基中培养所述单核细胞。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述条件培养基与所述基础培养基的比例在10:1至1:10的范围。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述条件培养基与所述基础培养基的比例是1:1。

9.根据权利要求5至8中任一项所述的方法，其中所述低血清基础培养基中的血清水平为0.1％至10％的百分比。

10.一种用于从单核细胞衍生肝巨噬细胞的试剂盒，其包含条件培养基和基础培养基，其中所述条件培养基通过以下方法获得，所述方法包括：

(i)在细胞外基质存在下，在无血清细胞培养基中培养肝细胞1至7天；和

(ii)在(i)中的培养过程结束时分离上清液。

11.根据权利要求10所述的试剂盒，其还包含未使用细胞外基质包被的细胞培养装置。

12.根据权利要求10或11所述的试剂盒，其中所述基础培养基适于用作低血清基础培养基。

13.根据权利要求10至12中任一项所述的试剂盒，其还包含一种或多种用于所述基础培养基的以下补充剂：胰岛素、转铁蛋白、亚硒酸、白蛋白、脂肪酸、谷氨酰胺补充剂和缓冲剂。