[发明专利]用于治疗脑缺血的药物方案

说明书

当本发明的治疗采用溶血栓剂与用于与治疗癌症患者时相比剂量降低的低剂量的溶血栓剂和血管内皮生长因子受体信号转导(VEGF‑RST)抑制剂联用时，经历脑缺血的受试者的治疗得到改善。还通过配制在室温下长期稳定的蛋白质药物、提供适合该方法的剂量、以及通过将治疗剂与用于血脑屏障完整性的定点照护诊断相结合，也改进了该治疗，使其能定点照护使用。

相关申请的交叉引用

本申请要求2017年1月5日提交的美国临时申请第62/442,826号和2017年3月10日提交的第62/470,086号的优先权，其通过引用整体并入本文。

技术领域

本发明涉及生理病症的生物标志物领域，涉及治疗经历脑缺血、在药理性或机械性溶血栓后有出血性转化风险的患者的方法和用于实施该方法的试剂盒。特别是，本发明涉及有效剂量的、提供短暂而非长期抑制的血管内皮生长因子(VEGF)受体介导的信号转导(VEGF-RST)抑制剂。本发明还涉及稳定蛋白质药物以消除对冷冻储存的需求，以及以减少氧自由基损伤并且减少通过注射递送时的蛋白质聚集的方式对药物的包装。本发明还涉及机械性溶血栓中的改进。

背景技术

PCT申请PCT/JP2010/062631，公开号为WO2011/013668，在美国以美国序列号13/359,281(现为美国专利号8,652,476和9,439,961)的部分继续申请，描述了一种用于治疗人的脑梗死或缺血的改进的方法，其通过在脑缺血的急性期(被认为是脑梗死发作后的6小时内)施用溶血栓干预和VEGF-RST抑制剂的组合。这将治疗窗口从3小时延长到6小时。

提供抑制VEGF-RST的药剂改善了溶血栓剂在这种治疗的增强时间窗口内的出血性影响。该治疗扩大了溶血栓疗法的适格群体，包括扩大了施用溶血栓剂的益处超过风险的时间窗口。然而，这些文献表明VEGF-RST抑制剂的剂量水平不受限制并且建议高剂量的抗VEGF抗体抑制剂——在用于治疗癌症的范围内。

有关此类方案的研究已经发表。Zhang,Z.G.等在《临床调查杂志(J.Clin.Invest.)》(2000)106:829–838中，在大鼠模型中，在中风诱导后早期(1小时)和晚期(48小时)施用结合VEGF的抗体。使用哈佛泵(哈佛仪器公司(Harvard Apparatus)；南纳蒂克，马萨诸塞州，美国)，以1mg/kg的剂量、4小时间隔向大鼠静脉输注rhVEGF₁₆₅(基因泰克公司(Genentech Inc.)，旧金山，加利福尼亚州，美国)。早期给药是有害的，而晚期给药是有益的。改善tPA毒性所需的抗VEGF抗体的剂量水平基于多克隆抗体RB-222：Kanazawa,M.等，《脑血流与代谢杂志(J Cereb Blood Flow Metab)》(2011)31:1461-74。之后的研究也基于多克隆抗血清，并通过调节MMP的表达显示BBB破坏的减弱。Zhang,H-T.等，《分子医学报告(Mol Med Rep.)》(2017)15:57-64。

脑梗死发作的时间通常难以确定，因为当时对象未受到医学照看。此外，有栓塞性中风的对象中的血-脑屏障(BBB)受损是溶血栓后的出血的风险因素。如本发明人在WO2015/138974中所述，BBB完整性受扰的严重程度和时期的确定可以通过使用血液中存在的BBB完整性标志物来完成。Marchi,N.等在《神经科学神经病学研究(Res.Neurol.Neurosci.)》(2002)20:1-13的论文、其相应的专利U.S.7,144,708和U.S.6,884,591及其之后的作为WO2012/154889公布的PCT申请描述了合适的标志物。这些文献描述了用于诊断对象中血-脑屏障通透性的方法，包括测定血液中的S100B或其二聚体的总水平，其中，升高的S100B或其二聚体水平表明BBB通透性。另见Zhou,S.等，《神经内科研究(Neurolog.Res.)》(2016)38:327-332。