[发明专利]单链结合蛋白

权利要求书

1.单链DNA结合蛋白(SSB)去杂交DNA分子的用途，所述SSB在500mM钠离子存在下表现出其最大ssDNA结合能力的至少50％，其中所述SSB包含：SEQ ID NO：1的氨基酸序列或与SEQ ID NO：1至少75％相同的氨基酸序列，或其功能片段，并且其中所述DNA分子存在于或暴露于含有以下中一种或多种的溶液中：

(i)至少350mM的钠离子，

(ii)至少50mM的钾离子，

(iii)至少150mM的镁离子，或

(iv)至少200mM的钙离子。

2.单链DNA结合蛋白(SSB)防止互补ssDNA杂交的用途，所述SSB在500mM钠离子存在下表现出其最大ssDNA结合能力的至少50％，其中所述SSB包含：SEQ ID NO：1的氨基酸序列或与SEQ ID NO：1至少75％相同的氨基酸序列，或其功能片段，并且其中所述ssDNA存在于或暴露于含有以下中一种或多种的溶液中：

(i)至少350mM的钠离子，

(ii)至少50mM的钾离子，

(iii)至少150mM的镁离子，或

(iv)至少200mM的钙离子。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的用途，其中，所述溶液含有至少500mM、优选至少750mM的钠离子。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的用途，其中，所述溶液含有至少100mM、优选至少300mM优选至少600mM的钾离子。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的用途，其中，所述溶液含有至少200mM、优选250mM的镁离子。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的用途，其中，所述溶液含有至少250mM、优选300mM的镁离子。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的用途，其中，所述SSB包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列或与其至少90％相同的氨基酸序列。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的用途，其中，所述SSB在SEQ ID NO：1的位置17和/或71处掺入取代。

9.根据权利要求8所述的用途，其中，所述取代氨基酸在pH7.0下在其侧链上带有正电荷，优选其中所述取代氨基酸选自赖氨酸和精氨酸。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的用途，其中，所述用途在以下方法期间进行：

i)核酸扩增、纯化或测序，优选纳米孔测序；

ii)定点突变；

iii)使用显微镜检查样品中的核酸结构；

iv)限制酶消化；

v)逆转录；

vi)增强T4聚合酶的活性；或

vii)保护ssDNA或RNA免受核酸酶消化。

11.一种单链DNA结合蛋白(SSB)，其在500mM钠离子存在下表现出其最大ssDNA结合能力的至少50％，并且包含：SEQ ID NO：1的氨基酸序列或与其至少75％相同的氨基酸序列，或其功能片段，并且其中所述氨基酸在位置17和/或71处已被取代。

12.根据权利要求18所述的SSB，其包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列。

13.一种核酸分子，其编码根据权利要求11或12中限定的SSB。

14.一种表达载体，其含有根据权利要求13所限定的核酸分子。

15.一种宿主细胞或病毒，其包含根据权利要求14所要求的表达载体。