[发明专利]诱导性多能干细胞的制作方法在审

专利信息
申请号: 201880013637.0 申请日: 2018-02-22
公开(公告)号: CN110352238A 公开(公告)日: 2019-10-18
发明(设计)人: 田边刚士;须藤健太;下田英范;布兰登·凯莉 申请(专利权)人: 田边刚士;爱平世股份有限公司
主分类号: C12N5/07 分类号: C12N5/07
代理公司: 北京铭硕知识产权代理有限公司 11286 代理人: 杨敏;金玉兰
地址: 美国加*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 体细胞 诱导性多能干细胞 制作 仙台病毒 转染试剂 培养基 初始化 凝胶
【权利要求书】:

1.一种诱导性多能干细胞的制作方法,其包含:

准备体细胞的步骤;及

将含有启动因子RNA的仙台病毒导入至所述体细胞的步骤。

2.根据权利要求1所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,

将所述含有启动因子RNA的仙台病毒导入至在凝胶培养基中悬浮培养的所述体细胞。

3.根据权利要求1所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,

将所述含有启动因子RNA的仙台病毒导入至附着培养的所述体细胞。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的诱导性多能干细胞的制作方法,

其进一步包含在凝胶培养基中对所述体细胞进行初始化的步骤。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,

所述体细胞为纤维母细胞。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,

所述体细胞为血液细胞。

7.根据权利要求6所述的诱导性多能干细胞的制作方法,

其进一步包含使用红血球分离剂,分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。

8.根据权利要求6所述的诱导性多能干细胞的制作方法,

其进一步包含使用过滤器,分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。

9.根据权利要求6所述的诱导性多能干细胞的制作方法,

其进一步包含使用免疫磁珠,分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,

所述启动因子RNA包含M3O或OCT3/4的mRNA、SOX2的mRNA、KLF4的mRNA、及c-MYC的mRNA。

11.根据权利要求2或4所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,

并不对所述凝胶培养基进行搅拌。

12.根据权利要求2或4所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,

所述凝胶培养基不含生长因子。

13.根据权利要求2或4所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,

所述凝胶培养基以40质量%以下的浓度含有生长因子。

14.根据权利要求2或4所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,

所述凝胶培养基不含bFGF。

15.一种诱导性多能干细胞的制作方法,其包含:

准备体细胞的步骤;

使用RNA转染试剂将启动因子RNA导入至所述体细胞的步骤;及

在凝胶培养基中对所述体细胞进行初始化的步骤。

16.根据权利要求15所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,

所述体细胞为纤维母细胞。

17.根据权利要求15所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,

所述体细胞为血液细胞。

18.根据权利要求17所述的诱导性多能干细胞的制作方法,

其进一步包含使用红血球分离剂,分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。

19.根据权利要求17所述的诱导性多能干细胞的制作方法,

其进一步包含使用过滤器,分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。

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