[发明专利]诱导性多能干细胞的制作方法在审
申请号: | 201880013637.0 | 申请日: | 2018-02-22 |
公开(公告)号: | CN110352238A | 公开(公告)日: | 2019-10-18 |
发明(设计)人: | 田边刚士;须藤健太;下田英范;布兰登·凯莉 | 申请(专利权)人: | 田边刚士;爱平世股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/07 | 分类号: | C12N5/07 |
代理公司: | 北京铭硕知识产权代理有限公司 11286 | 代理人: | 杨敏;金玉兰 |
地址: | 美国加*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 体细胞 诱导性多能干细胞 制作 仙台病毒 转染试剂 培养基 初始化 凝胶 | ||
1.一种诱导性多能干细胞的制作方法,其包含:
准备体细胞的步骤;及
将含有启动因子RNA的仙台病毒导入至所述体细胞的步骤。
2.根据权利要求1所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,
将所述含有启动因子RNA的仙台病毒导入至在凝胶培养基中悬浮培养的所述体细胞。
3.根据权利要求1所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,
将所述含有启动因子RNA的仙台病毒导入至附着培养的所述体细胞。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的诱导性多能干细胞的制作方法,
其进一步包含在凝胶培养基中对所述体细胞进行初始化的步骤。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,
所述体细胞为纤维母细胞。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,
所述体细胞为血液细胞。
7.根据权利要求6所述的诱导性多能干细胞的制作方法,
其进一步包含使用红血球分离剂,分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。
8.根据权利要求6所述的诱导性多能干细胞的制作方法,
其进一步包含使用过滤器,分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。
9.根据权利要求6所述的诱导性多能干细胞的制作方法,
其进一步包含使用免疫磁珠,分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,
所述启动因子RNA包含M3O或OCT3/4的mRNA、SOX2的mRNA、KLF4的mRNA、及c-MYC的mRNA。
11.根据权利要求2或4所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,
并不对所述凝胶培养基进行搅拌。
12.根据权利要求2或4所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,
所述凝胶培养基不含生长因子。
13.根据权利要求2或4所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,
所述凝胶培养基以40质量%以下的浓度含有生长因子。
14.根据权利要求2或4所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,
所述凝胶培养基不含bFGF。
15.一种诱导性多能干细胞的制作方法,其包含:
准备体细胞的步骤;
使用RNA转染试剂将启动因子RNA导入至所述体细胞的步骤;及
在凝胶培养基中对所述体细胞进行初始化的步骤。
16.根据权利要求15所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,
所述体细胞为纤维母细胞。
17.根据权利要求15所述的诱导性多能干细胞的制作方法,其中,
所述体细胞为血液细胞。
18.根据权利要求17所述的诱导性多能干细胞的制作方法,
其进一步包含使用红血球分离剂,分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。
19.根据权利要求17所述的诱导性多能干细胞的制作方法,
其进一步包含使用过滤器,分离单核细胞作为所述体细胞的步骤。
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