[发明专利]分离抗体的分离基质和方法在审
| 申请号： | 201880014006.0 | 申请日： | 2018-02-15 |
| 公开（公告）号： | CN110325274A | 公开（公告）日： | 2019-10-11 |
| 发明（设计）人： | R.帕尔姆格伦;J-L.马卢瓦塞尔;G.罗德里戈;T.毕约克曼 | 申请（专利权）人： | 通用电气医疗集团生物工艺研发股份公司 |
| 主分类号： | B01J20/286 | 分类号： | B01J20/286;B01D15/38;B01J20/32;B01J20/28;B01D15/18;C07K1/22 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 初明明;林毅斌 |
| 地址： | 瑞典乌*** | 国省代码： | 瑞典;SE |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多孔粒子 分离基质 分配系数 凝胶相 配体 分离抗体 共价固定 结合蛋白 葡聚糖 抗体 中位 加权 | ||
1. 一种包含抗体-结合蛋白配体已被共价固定于其上的多孔粒子的分离基质，其中所述配体的密度为大于5 mg/ml，所述多孔粒子的体积-加权中位直径为至少10 μm和小于30μm，和所述多孔粒子具有0.5-0.9的凝胶相分配系数，所述凝胶相分配系数表示为对于分子量110 kDa的葡聚糖的KD。
2. 权利要求1的分离基质，其中所述配体的密度在5 - 25 mg/ml、例如11-20 mg/ml的范围内。
3. 权利要求1或2的分离基质，其中所述多孔粒子具有0.6-0.85的凝胶相分配系数，所述凝胶相分配系数表示为对于分子量110 kDa的葡聚糖的KD。
4.任一项前述权利要求的分离基质，其中所述多孔粒子是球形的。
5.任一项前述权利要求的分离基质，其中所述多孔粒子包含交联多糖。
6.任一项前述权利要求的分离基质，其中所述多孔粒子包含交联琼脂糖。
7.权利要求6的分离基质，其中琼脂糖在凝胶化之前已被烯丙基化。
8.任一项前述权利要求的分离基质，其中所述配体包含Fc-结合蛋白。
9.权利要求8的分离基质，其中所述Fc-结合蛋白是蛋白A。
10.任一项前述权利要求的分离基质，其中所述配体包含蛋白A结构域的单体、二聚体或多聚体。
11.权利要求10的分离基质，其中一个或多个所述结构域已被突变。
12.权利要求11的分离基质，其中一个或多个所述结构域衍生自蛋白Z，或蛋白A的B或C结构域，并且其中在位置23的氨基酸残基是苏氨酸。
13. 权利要求10-12的任一项的分离基质，其中一个或多个所述结构域包含由SEQ IDNO: 8、9或10定义的氨基酸序列，或与SEQ ID NO: 8、9或10具有至少90%或至少95或98%同一性的氨基酸序列。
14. 任一项前述权利要求的分离基质，其在20 +/- 2℃下在0.5 M NaOH中孵育5小时后保留至少95%的其原始结合能力。
15. 权利要求8-14的任一项的分离基质，其中所述基质具有在0.5 min停留时间下至少20 mg/ml、例如至少30 mg/ml的动态IgG能力q10%。
16.一种色谱柱(1)，其包含依据任一项前述权利要求的分离基质。
17. 权利要求16的色谱柱，其包含所述分离基质的填充床(2)，其中所述填充床具有至多5或10 cm，例如2-5 cm、2-4 cm或2-3 cm的床高(h)。
18.一种色谱系统(10)，其包含多个依据权利要求16或17的色谱柱(11、12、13)。
19.权利要求18的色谱系统，其中所述色谱柱被并行连接。
20.权利要求18的色谱系统，其被安排执行连续的色谱。
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