[发明专利]使用抗体的靶标核酸浓缩和回收方法在审
申请号: | 201880014824.0 | 申请日: | 2018-03-27 |
公开(公告)号: | CN110352243A | 公开(公告)日: | 2019-10-18 |
发明(设计)人: | 海老沼宏幸;内田桂 | 申请(专利权)人: | 积水医疗株式会社 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/6806;G01N33/50;C07K1/22 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 张国梁;张莹 |
地址: | 日本国*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核酸 蛋白质 核蛋白 特异性抗体 捕获 表面活性剂处理 病毒 浓缩 核酸复合物 细胞 靶标核酸 靶向核酸 动物细胞 核酸回收 核酸结合 基因扩增 回收 靶向 包膜 解离 抗体 可用 细菌 发现 | ||
1.浓缩核酸的方法,包括以下步骤(a)至(c):
(a)提供含有蛋白质-核酸复合物的样品,其中蛋白质和核酸是结合的;
(b)使所述样品、与所述蛋白质特异性反应的抗体和能够吸附所述抗体的载体相互接触;和
(c)从所述样品中回收所述载体,以便在所述载体上获得浓缩的核酸。
2.根据权利要求1所述的方法,进一步包括步骤(d)将所述浓缩的核酸与所述载体分离。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中在步骤(b)中,接触的所述载体是抗体支持载体,其中所述抗体由所述载体支持。
4.根据权利要求3所述的方法,其中在步骤(d)中,通过免疫反应从附着于所述抗体支持载体的蛋白质-核酸复合物中释放所述核酸。
5.根据权利要求1至4任一项所述的方法,其中在步骤(b)中,所述抗体和所述蛋白质-核酸复合物彼此结合以形成抗体-蛋白质-核酸复合物。
6.根据权利要求5所述的方法,其中在步骤(d)中,从通过物理吸附而吸附于所述载体的抗体-蛋白质-核酸复合物中释放所述核酸。
7.根据权利要求1至6所述的方法,
在步骤(a)之前、在步骤(a)中或在步骤(a)与步骤(b)之间进一步包括以下步骤(a′):
(a′)将表面活性剂添加到含有所述蛋白质-核酸复合物的样品中。
8.根据权利要求7所述的方法,其中所述表面活性剂是选自非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂和两性表面活性剂中的一种或多种。
9.根据权利要求1至8任一项所述的方法,其中所述样品是选自生物样品和含有病原微生物或病毒的样品中的一种或多种。
10.根据权利要求9所述的方法,其中所述生物样品是动物细胞。
11.根据权利要求10所述的方法,其中所述生物样品是选自血液、血浆、血清、尿液、粪便、胆汁、胰液、鼻涕和鼻腔/咽拭子液中的一种或多种。
12.根据权利要求9所述的方法,其中所述含有病原微生物或病毒的样品是病原微生物或病毒的培养物。
13.根据权利要求9所述的方法,其中所述病毒是流感病毒。
14.根据权利要求1至13任一项所述的方法,其中所述蛋白质是核蛋白。
15.根据权利要求14所述的方法,其中所述核蛋白是选自组蛋白和核衣壳蛋白中的一种或多种。
16.根据权利要求1至15任一项所述的方法,其中与所述蛋白质-核酸复合物特异性反应的抗体是识别核蛋白的抗体。
17.根据权利要求16所述的方法,其中所述识别核蛋白的抗体是选自抗组蛋白抗体和识别核衣壳蛋白的抗体中的一种或多种。
18.根据权利要求1至17任一项所述的方法,其中所述核酸是不包括信使RNA(mRNA)的核酸。
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