[发明专利]RNA分子与肽的复合体的制造方法及其利用在审

专利信息
申请号: 201880018535.8 申请日: 2018-03-15
公开(公告)号: CN110637086A 公开(公告)日: 2019-12-31
发明(设计)人: 上田泰己;清水义宏;原田颂子;松本桂彦 申请(专利权)人: 珂璧斯塔斯株式会社
主分类号: C12N15/09 分类号: C12N15/09;C12N15/11;C12P21/02;C40B40/08
代理公司: 11728 北京信诺创成知识产权代理有限公司 代理人: 尹吉伟
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要:
搜索关键词: 复合体 核苷衍生物 翻译产物 模板DNA 反义链 末端侧 肽受体 修饰 连结 基因
【权利要求书】:

1.一种RNA分子与肽的复合体的制造方法,其制造对肽进行编码的RNA分子、与编码于所述RNA分子中的肽的复合体,其特征在于包括:

步骤(i):其是通过包含启动子区域以及对位于其下游的肽进行编码的区域的DNA分子进行转录反应来制作RNA分子的步骤,且为在所述DNA分子的最下游的反义链的5'末端侧包含至少一个2'-修饰核苷衍生物的步骤;

步骤(ii):其是在步骤(i)中所获得的所述RNA分子的3'末端,使用夹板多核苷酸作为支架来结合肽受体分子的步骤;以及

步骤(iii):其是通过将步骤(ii)中所获得的结合有肽受体分子的所述RNA分子进行翻译,来制作所述RNA分子、与编码于所述RNA分子中的肽经由所述肽受体分子而连结的RNA分子与肽的复合体的步骤。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,

所述翻译是在实质上不包含核糖核酸酶的体外翻译系统中进行。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,

所述翻译是在实质上不包含对所述DNA分子具有活性的RNA聚合酶的体外翻译系统中进行。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其特征在于,

所述DNA分子包含连续的两个2'-修饰核苷衍生物。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其特征在于,

所述2'-修饰核苷衍生物为2'-O-甲基鸟苷。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法,其特征在于,

所述肽受体分子为嘌呤霉素。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其特征在于,

使用多个不同的所述DNA分子来制作多个不同的RNA分子与肽的所述复合体。

8.一种mRNA展示法,其包含根据权利要求1至7中任一项所述的方法,其特征在于,

包括步骤(iv),其从步骤(iii)中所获得的RNA分子与肽的复合体中选出所需的复合体。

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,

将步骤(i)~步骤(iv)作为一个循环,反复进行多个循环。

10.一种DNA文库,其用于mRNA展示法,其特征在于,

包含多个不同的候选DNA分子,所述候选DNA分子包含启动子区域以及对位于其下游的候选肽进行编码的区域,且在最下游的反义链的5'末端侧包含至少一个2'-修饰核苷衍生物。

11.根据权利要求10所述的DNA文库,其特征在于,

包含1013个以上不同的候选DNA分子。

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