[发明专利]使用FAD依赖性葡糖脱氢酶的连续葡萄糖监测

权利要求书

1.一种连续葡萄糖监测方法，包括使用具有以下能力的GDH

(a)当保持在约37-40℃时，在1周内保持初始活力的约60％或以上，

(b)当保持在约37-40℃时，在2周内保持初始活力的约40％或以上，或者

(c)当保持在约37-40℃时，在3周内保持初始活力的约30％或以上，

其中所述GDH是FAD依赖性GDH并且其中所述GDH不是膜结合蛋白。

2.根据权利要求1所述的方法，其中当保持在pH 7.4时，所述GDH能够保持权利要求1的(a)至(c)中所指明的活力。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中可以在不进行再校准的情况下进行连续葡萄糖监测。

4.一种筛选在连续葡萄糖监测中使用的GDH的方法，所述方法包括以下步骤：

(i)制备候选GDH，

(ii)将所述候选GDH在约30-40℃保持预定时间段，

(iii)在步骤(ii)之后确定所述GDH的残余活力，

(iv)将步骤(iii)中所确定的残余活力与所述候选GDH的初始活力相比较，

其中，当所述残余GDH活力

(a)当在约30-40℃保持1周时，与初始GDH活力相比，为约60％或以上，

(b)当在约30-40℃保持2周时，与初始GDH活力相比，为约40％或以上，或者

(c)当在约30-40℃保持3周时，与初始GDH活力相比，为约30％或以上，

则将所述候选GDH选作具有在连续葡萄糖监测中使用1至3周的潜力的GDH。

5.根据权利要求4所述的方法，其中步骤(ii)未替换为包括在约50-60℃的温度下热处理约5-30分钟的加速热处理步骤。

6.一种连续葡萄糖监测装置，其包括具有以下能力的GDH

(a)当保持在约37-40℃时，在1周内保持初始活力的约60％，

(b)当保持在约37-40℃时，在2周内保持初始活力的约40％，或者

(c)当保持在约37-40℃时，在3周内保持初始活力的约30％，其中所述GDH是FAD依赖性GDH并且其中所述GDH不是膜结合蛋白。

7.根据权利要求6所述的装置，其中当保持在pH 7.4时，所述GDH能够保持权利要求6的(a)至(c)中所指明的活力。

8.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述GDH具有以下特性：

(1)如权利要求1的(a)至(c)中任一项所定义的活力，

(2)底物特异性：相对于对D-葡萄糖的反应性(100％)，对麦芽糖的反应性为2％或以下；

(3)最适活力pH：6.5至7.5；和

(4)当通过SDS-PAGE测量时，约65至约81kDa的分子量。

9.根据权利要求1-5和8中任一项所述的方法，其中所述GDH来自属于毛霉属(Mucor)、犁头霉属(Absidia)、放射毛霉属(Actinotnucor)、卷霉属(Circinella)、Parasitella属或根霉属(Rhizopus)的微生物。