[发明专利]使用FAD依赖性葡糖脱氢酶的连续葡萄糖监测

说明书

提供了包括使用FAD‑GDH的连续葡萄糖监测(CGM)方法。FAD‑GDH能够在特定的一段时间内保持初始活力。还提供了筛选适合在CGM中使用的FAD‑GDH的方法以及包括FAD‑GDH的CGM装置。

技术领域

本发明涉及使用FAD依赖性葡糖脱氢酶的连续葡萄糖监测。

背景技术

连续葡萄糖监测(CGM，也称为快速葡萄糖监测，FGM)系统对于糖尿病的诊断和控制是重要的。CGM系统能够在几天至约1-2周的一段时间内测量血糖水平。CGM系统包括葡萄糖传感器。

可以用葡萄糖氧化酶(GOD)进行葡萄糖水平的测量。当氧化葡萄糖时，葡萄糖氧化酶使用氧作为电子受体。这可能受测量样品中存在的溶解氧的影响。目前，就我们所知，可商购的CGM装置全部基于葡萄糖氧化酶(GOD)。某些GOD，如来自属于曲霉属(Aspergillussp.)的微生物，如黑曲霉(Aspergillus niger)的GOD已知即使置于严苛的热状况下时，仍保持酶活力(非专利文献1：THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY Vol.278,No.27,Issue of July 4,pp.24324-24333,2003)。为此，一般说来，CGM系统使用热稳定的GOD。

专利文献文档1(WO 2015/099112，US20160319246)描述了来自属于毛霉属(Mucor)的微生物的GDH。

非专利文献2(Satake等人,J Biosci Bioeng.2015Nov；120(5):498-503)描述了来自普雷恩毛霉(Mucor prainii)的FAD-GDH。该文档说明“基于其高热稳定性和高葡萄糖选择性，葡萄糖氧化酶(GOD)(EC 1.1.3.4)已广泛用作介导的电流测量的葡萄糖传感器”。

专利文献文档2(WO 2002/036779，US 2004/0023330)描述了来自洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)的GDH。所公开的GDH是膜结合蛋白并且包括细胞色素C域。洋葱伯克霍尔德菌(B.cepacia)GDH的氨基酸序列与来自属于毛霉属(Mucor)的微生物的FAD依赖性GDH(在本文中也称为FAD-GDH)的氨基酸序列不类似。

专利文献文档3(WO2013/051682)描述了来自季也蒙毛霉(Mucorguilliermondii)的GDH(MgGDH)。

专利文献文档4(JP专利申请公开(Kokai)No.2013-116102)描述了来自冻土毛霉(Mucor hiemalis)的GDH(MhGDH)。

专利文献文档5(WO 2013/022074，US20140154777)描述了来自单卷霉(Circinella simplex)的CsGDH和来自卷霉属(Circinella)种的CRGDH。

专利文献文档6(JP专利申请公开(Kokai)No.2013-176363)描述了来自毛霉属(Mucor)RD056860的MdrGDH。

专利文献文档7(JP专利申请公开(Kokai)No.2013-176364)描述了来自细孢毛霉(Mucor subtilissimus)的MsGDH。

专利文献文档8(WO 2012/169512，US20140287445)描述了来自普雷恩毛霉(M.prainii)的GDH。

专利文献文档9(WO 2015/129475，EP3112461)描述了来自普雷恩毛霉(M.prainii)的GDH。

专利文献文档10(JP专利申请公开(Kokai)No.2014-207911)描述了PQQ依赖性GDH。据报道所公开的PQQ依赖性GDH对麦芽糖具有活力。