[发明专利]肿瘤选择性TATA盒和CAAT盒突变体

说明书

本发明提供了例如一种重组病毒，其包含与基因可操作地连接的(i)修饰的基于TATA盒的启动子和/或(ii)修饰的基于CAAT盒的启动子，其中所述修饰的基于TATA盒的启动子和/或修饰的基于CAAT盒的启动子缺少具功能性TATA盒和/或CAAT盒，并允许所述基因在过度增殖性细胞中选择性表达。所述重组病毒可用于治疗细胞增殖性疾病和障碍，包括某些形式的癌症。

与相关申请的交叉引用

本申请要求2017年1月30日提交的美国临时专利申请系列号62/452,075的利益和优先权，所述临时申请在此整体通过参考并入本文。

技术领域

本发明的领域是分子生物学和病毒学，具体来说是偏好性感染过度增殖性和/或非生长停滞细胞的修饰的病毒。

背景技术

尽管对引起癌症的潜在分子机制已有广泛了解，但大多数晚期癌症仍不能使用当前的化疗和放射方案治愈。溶瘤病毒已成为具有显著增强当前用于各种不同恶性肿瘤的标准治疗的潜力的平台技术(Kumar，S.等，(2008)，CURRENT OPINION IN MOLECULARTHERAPEUTICS10(4)：371-379；Kim，D.，(2001)，EXPERT OPINION ON BIOLOGICAL THERAPY1(3)：525-538；Kim D.(2000)ONCOGENE 19(56)：6660-6669)。已显示，这些病毒有希望作为不仅通过感染-繁殖-裂解的链式反应直接破坏恶性细胞，而且间接地诱导抗肿瘤免疫力的溶瘤剂。这些免疫刺激性质，通过在每次病毒复制时复制并表达的治疗性转基因的插入而被增强。

以前开发的溶瘤病毒包括被称为TAV-255的溶瘤性5血清型腺病毒(Ad5)，其在正常细胞中被转录弱化但在癌细胞中有转录活性(参见PCT公布号WO2010/101921)。据信TAV-255载体实现这种肿瘤选择性的机制是通过用于转录因子Pea3和E2F的三个转录因子(TF)结合位点的靶向缺失，所述转录因子是通过结合到特定DNA序列来调控病毒进入宿主细胞后将会转录的最早基因E1a的腺病毒表达的蛋白质。

尽管到目前为止已作出尝试，但对具体来说表现出肿瘤选择性复制、病毒介导的裂解和/或治疗性转基因表达的用于在人类患者中治疗癌症或过度增殖性障碍的改进的溶瘤病毒，仍存在需求。

发明内容

本发明部分是基于下述发现，即对于某些病毒启动子来说，TATA和/或CAAT盒尽管对于在正常的健康细胞中驱动转录来说是必需的，但对于癌性细胞中的活跃转录来说是可有可无的。

因此，一方面，本发明提供了一种重组病毒，其包含：(i)与基因可操作地连接的修饰的基于TATA盒的启动子，其中所述修饰的基于TATA盒的启动子缺少功能性TATA盒并允许所述基因在过度增殖性和/或非生长停滞细胞中的选择性表达；和/或(ii)与基因可操作地连接的修饰的基于CAAT盒的启动子，其中所述修饰的基于CAAT盒的启动子缺少功能性CAAT盒并允许所述基因在过度增殖性和/或非生长停滞细胞中的选择性表达。

另一方面，本发明提供了一种重组病毒，其包含与基因可操作地连接的修饰的基于TATA盒的启动子，其中所述修饰的基于TATA盒的启动子缺少功能性TATA盒并允许所述基因在过度增殖性和/或非生长停滞细胞中的选择性表达。

另一方面，本发明提供了一种重组病毒，其包含与基因可操作地连接的修饰的基于CAAT盒的启动子，其中所述修饰的基于CAAT盒的启动子缺少功能性CAAT盒并允许所述基因在过度增殖性和/或非生长停滞细胞中的选择性表达。