[发明专利]分析物检测

权利要求书

1.一种表征样品中的分析物的方法，所述方法包括：

(a) 作为表面上(x, y)位置的函数，记录固定至表面的分析物的查询探针事件的时间依赖性信号；

(b) 按(x, y)位置将事件簇集成局部簇；和

(c) 计算每个事件簇的动力学参数以表征所述分析物。

2.权利要求1的方法，其中所述表面为固体支持物。

3.权利要求1的方法，其中所述表面为可扩散的。

4.权利要求1的方法，其中记录查询探针事件的时间依赖性信号包括以单分子灵敏度测量分析物的信号。

5.权利要求1的方法，其进一步包括计算差示强度图，所述差示强度图包含表面处作为(x, y)位置的函数的时间依赖性信号强度变化。

6.权利要求1的方法，其中(x, y)位置以亚像素准确度确定。

7.权利要求1的方法，其中簇集的事件代表单分析物分子的结合事件。

8.权利要求1的方法，其中表征所述分析物包括指示样品中分析物的存在、不存在、浓度或数量。

9.权利要求1的方法，其中所述分析物包含多肽。

10.权利要求9的方法，其中所述方法指示多肽上翻译后修饰的存在或不存在。

11.权利要求10的方法，其中所述翻译后修饰介导查询探针与多肽的瞬时缔合。

12.权利要求10的方法，其中化学亲和标签介导翻译后修饰和查询探针之间的瞬时缔合。

13.权利要求12的方法，其中所述化学亲和标签是核酸。

14.权利要求1的方法，其中所述分析物是核酸。

15.权利要求1的方法，其中查询探针与分析物的瞬时缔合可区别地受分析物的共价修饰的影响。

16.权利要求1的方法，其中所述查询探针是核酸或适体。

17.权利要求1的方法，其中所述查询探针是低亲和力抗体、抗体片段或纳米抗体。

18.权利要求1的方法，其中所述查询探针是DNA-结合蛋白、RNA-结合蛋白或DNA-结合核糖核蛋白复合物。

19.权利要求5的方法，其中每个查询探针事件的(x, y)位置通过使用形心确定、最小二乘拟合至高斯函数、最小二乘拟合至艾里斑函数、最小二乘拟合至多项式函数或最大似然估计处理差示强度分布图确定。

20.权利要求1的方法，其中在表面固定之前所述分析物在载体的存在下经历热或化学变性。

21.一种用于定量样品中的分析物的系统，所述系统包含：

(a) 将分析物稳定固定至表面的功能性；

(b) 以低亲和力结合靶分析物的自由扩散性查询探针；和

(c) 记录分析物的查询探针事件和查询探针事件的空间位置的检测系统。

22.权利要求21的系统，其进一步包含分析程序以根据所述靶分析物的重复结合和解离事件的空间位置和时机鉴定靶分析物的单个分子拷贝。

23.权利要求21的系统，其中所述查询探针是核酸或适体。