[发明专利]合成单保护双官能前药的方法和基于其的抗体药物缀合物以及制备抗体药物缀合物的方法

说明书

本发明涉及用于制备抗体药物缀合物(ADC)的化合物的合成方法，所述化合物即基于倍癌霉素类似物的单保护二聚双官能前药。在另一方面，提供了通过根据本发明的方法获得的化合物。单保护双官能前药用于制备由抗体部分和单保护双官能前药组成的抗体药物偶联物。提供了由此获得的抗体化合物缀合物。此外，提供了一种制备由两个相同或两个不同的抗体部分组成的抗体药物缀合物的方法，以及相应地包含两个不同的抗体部分的抗体化合物缀合物。这些缀合物可以用于药物组合物中，特别是用于治疗肿瘤，例如用于ADC治疗。

本发明涉及用于制备抗体药物缀合物(ADC)的化合物的合成方法，所述化合物即基于倍癌霉素(duocarmycin)类似物的单保护二聚双官能前药。在另一方面，提供了通过根据本发明的方法获得的化合物。单保护双官能前药用于制备由抗体部分和单保护双官能前药组成的抗体药物缀合物。提供了由此获得的抗体化合物缀合物。此外，提供了一种制备由两个相同或两个不同的抗体部分组成的抗体药物缀合物的方法，以及相应地包含两个不同的抗体部分的抗体化合物缀合物。这些缀合物可以用于药物组合物中，特别是用于治疗肿瘤，例如用于ADC治疗。

现有技术

各种形式的癌症疾病需要单独的治疗概念。为了应对肿瘤疾病的复杂性，当今大多数临床应用的治疗方法代表了不同治疗方法的组合。在外科手术可及且肿瘤明确的情况下，手术切除是可能选择的方法。但是，如果肿瘤更难以接近或影响重要结构，则放射治疗以及化学疗法是选择的方法。在已经发生转移或至少存在转移风险的更晚期阶段，通常立即进行化学疗法。另外，激素疗法、免疫疗法以及使用血管生成抑制剂和激酶抑制剂的疗法被用于肿瘤治疗。

实际上，对于转移或全身性肿瘤，化学疗法是目前最重要的治疗方法，尽管它通常与严重的副作用有关，例如血象异常、免疫缺陷、粘膜炎、发烧、恶心、呕吐。即，大多数化学治疗剂通过血液循环分布在全身，因此它们可以到达所有细胞。然而，化学治疗剂通常全身性地作用于人细胞，即它们阻止细胞增殖或发挥可能导致细胞死亡的细胞毒性。通常，化学治疗剂不能区分癌细胞和正常细胞。区别在于，肿瘤细胞是快速增殖的细胞类型，而正常细胞是缓慢增殖的细胞。但是，由于受治疗者的快速生长的非肿瘤细胞，特别是骨髓、发根和肠上皮细胞的非肿瘤细胞也受到影响，因而发生严重的副作用。用于化学疗法的细胞毒性剂的一个实例包括烷基化剂。烷基化剂是一类大量的在结构上差异显著的非常活泼的物质。在某些情况下，在将药物或前药预先活化为碳正离子后，活性化合物会作为亲电试剂发生反应，特别是与核酸发生反应，形成共价键。因此，发生DNA的交联、异常的碱基配对或链断裂，阻止了复制并最终导致细胞死亡。烷基化药物的典型例子是环磷酰胺，还有顺铂。一组特别有效的烷基化剂包括天然抗生素CC1065、环丙基吡咯并吲哚(CPI)衍生物、倍癌霉素(duocarmycins)和环丙基苯并吲哚(CBI)衍生物、雅特霉素(yatekemycin)，以及这类天然前药的衍生物和类似物。由于化学治疗的必要性，大部分临床使用药物的强烈副作用以及对许多已知化学治疗剂的耐药性的出现，化学治疗剂领域的持续发展是必要的。

为了减少化学疗法中的副作用，已经开发了利用肿瘤细胞的基因型和表型特性并使可逆前药直接在作用侧被靶向活化的新概念。这种靶向激活见于所谓的ADEPT概念(抗体导向的酶前药治疗)中。在这种情况下，使用抗体酶聚集体，在肿瘤中将无毒前药直接转化为药物，并实现更高的选择性。这种二元疗法包括两个步骤。首先，施加一定量的抗体酶缀合物，然后通过血液循环将其分布在整个生物体内。

缀合物与肿瘤细胞表面上的特定抗原结合或被身体降解或排泄。如果不能再检测到未结合的抗体酶聚集体，则在第二步中进行前药的应用。通常无毒的前药也分布在整个生物体中，并通过以抗体酶聚集体形式仅存在于肿瘤表面上的酶在肿瘤组织中选择性地发挥毒性作用。释放的药物在穿透细胞膜后展现出毒性作用，而酶在肿瘤细胞的外侧仍然保持活性，并可以激活其他前药分子。在这种方法的过程中，不应通过机体特异性酶系统裂解前药，否则会降低或消除治疗的活性。然而，先前已知的前药的这些优点在前药和由其产生的药物之间的细胞毒性差异(QIC50)太小，并且对于其形成的药物而言，细胞毒性太低(IC50)。