[发明专利]用于肿瘤预防的基于酵母的免疫疗法

说明书

本发明涉及用于制备免疫治疗性酵母的方法，所述免疫治疗性酵母在其壁上表达一种或多种肿瘤抗原；并且本发明还涉及能够通过实施本发明的方法获得的免疫治疗性酵母。

技术领域

本发明涉及用于制备免疫治疗性酵母的方法，所述免疫治疗性酵母在其壁上表达一种或多种肿瘤抗原；并且本发明还涉及能够通过实施本发明的方法获得的免疫治疗性酵母。

背景技术

癌症的治疗是汇集了包括免疫疗法在内的各种治疗方法的领域。在免疫疗法中，在被动免疫疗法和主动免疫疗法之间有区别，后者可能是靶向的或非靶向的。与化学疗法类型的疗法不同的是，主动免疫疗法的优点之一在于它们可以跨越血脑屏障的事实。

确实，已经证明淋巴细胞能够跨血脑屏障迁移(Larochelle C.,Alvarez JI,PratA.How do immune cells overcome the blood-brain barrier in multiplesclerosis.FEBS Lett.2011Dec 1；585(23):3770-80)。

除了这种跨越血脑屏障的优势之外，免疫疗法通常比传统的抗癌疗法具有更少的不利作用，这对于靶向免疫疗法来说尤其得到证实。这就是为何免疫疗法特别适用于已经高度虚弱的患者中的高级别III期或IV期转移性癌症的治疗。

非靶向主动免疫疗法(例如抗PD-1抗体和/或抗CTLA4抗体)显著提高患者的中位生存期。但是，这些治疗使小百分比的患者受益，并伴有显著的免疫学副作用(如自身免疫疾病)。为了克服自身免疫疾病的风险并提高其有效性，已经开发了针对确定的肿瘤抗原的靶向主动免疫疗法。树突状细胞是这些新免疫疗法的主要参与者，因为它们可以调节针对癌细胞的先天免疫应答和适应性应答。因此，靶向主动免疫疗法的目标之一是刺激这些树突状细胞产生肿瘤反应性T淋巴细胞、杀伤性T淋巴细胞或细胞毒性T淋巴细胞。这些T淋巴细胞的作用是诱导肿瘤尺寸的消退(可以最多达到肿瘤的消失)以及诱导免疫记忆，从而限制复发。

酵母酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)已被成功地用作靶向主动免疫疗法的载体，因为它构成了用于诱导树突状细胞的极佳佐剂，这转而激活细胞毒性T淋巴细胞来破坏癌细胞。为了使树突状细胞能够得以激活，酵母必须产生要靶向的肿瘤抗原。专利US 5830 463描述了非致病性酵母的用途，该非致病性酵母经基因修饰以表达至少一种能够调节免疫应答的化合物，并证明了当该酵母被给予哺乳动物时，这种基因修饰酵母在刺激细胞应答和体液应答中均有效。专利US 8 734 778描述了能够在其胞浆(cytosol)中表达多种肿瘤抗原的酵母，在注射前通过加热将该整个酵母杀死。专利申请US2008/0171059描述了在其表面而不是在胞浆中表达肿瘤抗原的酵母的用途。

然而，特别是与现有的免疫治疗性酵母相比，存在对有效的和/或具有较少不良副作用的新抗癌疗法的需求。

本发明人出乎意料地观察到，经基因修饰以在其壁上表达一种或多种肿瘤抗原并且经过透化的酵母使得可以有效地刺激针对肿瘤的细胞毒性T淋巴细胞。

发明内容

本发明的一个主题是用于制备免疫治疗性酵母的方法，所述方法包括下列步骤：

a)获得基因修饰酵母，所述基因修饰酵母在其壁上表达一种或多种肿瘤抗原以及任选的用于靶向树突状细胞的蛋白或多肽；

b)将所述基因修饰酵母透化以获得免疫治疗性酵母，任选地在透化步骤之前或之后使所述酵母灭活。

本发明的另一个主题由能够通过实施根据本发明的制备方法而获得的免疫治疗性酵母组成。

本发明的另一个主题涉及基因修饰并透化的免疫治疗性酵母，所述酵母在其壁上表达：