[发明专利]细胞层叠体的制造方法

权利要求书

1.一种细胞层叠体的制造方法，其使用具有底部及从所述底部的外缘立起的侧壁部的容器、多孔膜、和在与所述容器的内底面不接触的位置对置于该内底面地保持所述多孔膜的保持部件来制造在所述多孔膜的两面具备细胞层的细胞层叠体，所述细胞层叠体的制造方法包括：所述多孔膜由所述保持部件保持为在与所述容器的内底面不接触的位置对置于该内底面的状态，而且在重力方向上所述容器的所述底部在上方且所述多孔膜在下方的状态下，在与所述容器的内底面和所述多孔膜表面接触的液体培养基中培养第一细胞；及所述多孔膜由所述保持部件保持为在与所述容器的内底面不接触的位置对置于该内底面的状态，而且在重力方向上所述容器的所述底部在下方且所述多孔膜在上方的状态下，在所述多孔膜的下侧表面上培养所述第一细胞，在所述多孔膜的上侧表面上培养第二细胞；所述多孔膜的开口率为30%～70%，所述多孔膜为具有蜂窝结构的多孔膜，所述第一细胞和所述第二细胞为不同种类的细胞。

2.根据权利要求1所述的细胞层叠体的制造方法，其中，所述容器的内底面具有所述第一细胞不粘附的性质。

3.根据权利要求1所述的细胞层叠体的制造方法，其中，所述保持部件具备：筒状部，其为在轴向的一端保持所述多孔膜的筒状部，并具有比所述容器的内径小的外径，轴向的长度比所述容器的所述侧壁部的高度短；及突出部，从所述筒状部的轴向的另一端向径向外侧突出，并悬挂在所述容器的所述侧壁部的边缘。

4.根据权利要求1所述的细胞层叠体的制造方法，其中，所述多孔膜的材质为选自聚丁二烯、聚苯乙烯、聚碳酸酯、聚乳酸及聚乳酸-聚乙醇酸共聚物中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的细胞层叠体的制造方法，其中，所述多孔膜中至少培养细胞的表面由选自纤连蛋白、胶原蛋白、层粘蛋白、玻连蛋白、明胶、基底膜蛋白聚糖、巢蛋白、蛋白聚糖、骨桥蛋白、腱生蛋白、肾连蛋白、基底膜基质及聚赖氨酸中的至少一种包覆。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的细胞层叠体的制造方法，其中，所述第一细胞和所述第二细胞两种细胞是选自实质细胞、间质细胞、肌细胞、成纤维细胞、神经细胞、内皮细胞、上皮细胞及分化为它们中的任一个的细胞中的两种细胞。

7.根据权利要求6所述的细胞层叠体的制造方法，其中，所述第一细胞是平滑肌细胞或分化为平滑肌细胞的细胞，所述第二细胞是血管内皮细胞或分化为血管内皮细胞的细胞。