[发明专利]用于siRNA细胞内递送的脂质膜结构体

说明书

该脂质膜结构体是含有式(I)：(R¹)(R²)C(OH)‑(CH₂)a‑(O‑CO)b‑X的脂质化合物作为脂质成分的脂质膜结构体。式(I)中，a表示3～5的整数；b表示0或1的整数；R¹和R²分别独立地表示可具有‑CO‑O‑的直链状烃基；X表示5～7元非芳族杂环基或下述的式(B)所示的基团，式(B)中，d表示0～3的整数，R³和R⁴分别独立地表示C_1‑4烷基或C_2‑4烯基，R³和R⁴可彼此键合形成5～7元非芳族杂环(该环上可被1个或2个的C_1‑4烷基或C_2‑4烯基取代)。

技术领域

本发明涉及用于siRNA(short interfering RNA)等的细胞内递送(送達)的脂质膜结构体。更具体而言，本发明涉及可容易地将siRNA等递送至免疫细胞的核内、特别是树突细胞的细胞内的脂质体等的脂质膜结构体。

本申请根据于2017年6月15日在日本申请的特愿2017-117708号要求优先权，并将其内容引用于此。

背景技术

作为将药物特异性地输送到患部的手段，提出了将药物包封作为脂质膜结构体的脂质体中的方法。特别是在恶性肿瘤的治疗领域中，有很多包封抗肿瘤剂的脂质体的有效性的报道。另外，作为可用于基因表达的脂质膜结构体，提出了多功能信封式纳米结构体(MEND：Multifunctional envelope-type nano device，以下，在本说明书中，有时简称为“MEND”。例如参照非专利文献1等)。已知该结构体可用作将基因等选择性地递送到特定的细胞内的药物递送系统(Drug Delivery System)，例如，在肿瘤的基因治疗等中是有用的。

作为使用脂质膜结构体用于将药物、核酸、肽、多肽、糖等目标物质递送至靶器官或肿瘤组织等特异性部位的手段，提出了许多用功能性分子修饰脂质膜结构体的表面的方法。若内封有抗肿瘤剂等药物的脂质膜结构体到达靶细胞，则通过胞吞作用被摄入到细胞内，从而形成被包含在内体中的状态，其后，受到溶酶体的酶的水解作用等，将内封的药物释放到细胞质内。为了提高从被摄入到内体中的脂质体的药物释放性，提出了将脂质体的表面用肽(GALA：非专利文献2)修饰而得的脂质体(非专利文献3)或MEND(专利文献4)。

另外，作为用于使内封核酸等目标物质的脂质膜结构体转运至靶细胞的核内的手段，例如，提出了将脂质体的外侧表面用八聚精氨酸修饰而得的脂质体(专利文献1、非专利文献4)、具有用核转运肽修饰的脂质膜的两层膜脂质体(专利文献2)、用半乳糖或甘露糖等单糖修饰表面而得的脂质体(专利文献3)。据报道，用单糖修饰的多脂质膜结构体(T-MEND)显示与脂质膜和核膜的融合性，在体外的试验结果中，可改善基因表达效率。而且，报道了通过KALA肽(非专利文献5)修饰的脂质膜结构体可有效地将核酸等物质递送至细胞的核内(专利文献5)。

另一方面，由于树突细胞是担负免疫应答的关键作用的抗原呈递细胞，因此是癌症免疫疗法的重要的靶细胞之一。也有人进行了：从癌症患者采取树突细胞，在体外进行抗原导入或活化之后，再对该患者进行给予的免疫细胞疗法(树突细胞疗法)。近年来，由于发现树突细胞中的免疫抑制因子，因此树突细胞作为siRNA药物的靶也备受关注，通过将树突细胞疗法与免疫疗法组合，可期待进行更强力的癌症免疫诱导。

以往，关于将RNA导入至树突细胞的核内，有使用表达shRNA的慢病毒载体敲减免疫抑制因子的报道(非专利文献6、非专利文献7)。但是，几乎没有使用人工递送系统向树突细胞导入siRNA的报道。病毒载体的使用可实现靶基因的高效率敲减，但在安全方面存在问题。