[发明专利]测量分子间和/或分子内相互作用的方法

权利要求书

1.一种测量标记粒子与配体之间的相互作用的方法，其包括步骤：

a)提供包含在溶液中的标记粒子和配体的样品，其中所述标记粒子溶解或分散在溶液中或固定在固体载体上；

b)在预定温度下荧光激发所述标记粒子和检测受激粒子的荧光；

c)以溶液中的不同配体浓度重复步骤(a)和(b)多次；和

d)基于标记粒子的荧光的配体浓度依赖性变化测定标记粒子与配体之间的相互作用，

其中所述标记粒子用一种或多种染料标记，所述染料选自通式(I)、(IIa)、(IIb)或(III)所示的染料：

其中

X¹是O、S或CR⁵R⁶；

X²是O、S或CR⁷R⁸；

R¹和R²各自独立地选自氢和可被取代的烷基；

R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷和R⁸各自独立地选自羟基、羧基、磺酸、硫羟或其盐、氢、卤素、可被取代的羧酸酯基团、硝基、胺、酰胺、可被取代的烷基、可被取代的烷氧基和可被取代的烯基；

条件是R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷和R⁸的至少一个是间隔基团，染料通过该间隔基团共轭到粒子上，其中所述间隔基团比两个CH₂基团长；

a是0至4的整数；

b是0至4的整数；且

n是1至3，优选1或2的整数；

其中

X³和X⁴之一是NR⁹且X³和X⁴的另一个是O、S或CR¹³R¹⁴；

R⁹选自氢和可被取代的烷基；

R¹⁰、R¹¹、R¹²、R¹³和R¹⁴各自独立地选自羟基、羧基、磺酸、硫羟或其盐、氢、卤素、可被取代的羧酸酯基团、硝基、胺、酰胺、可被取代的烷基、可被取代的烷氧基和可被取代的烯基；

条件是R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹²、R¹³和R¹⁴的至少一个是间隔基团，染料通过该间隔基团共轭到粒子上，其中所述间隔基团比两个CH₂基团长；

c是0至4的整数；

d是0至2的整数；

e是0至4的整数；且

m是1至3，优选1或2的整数；和

其中

Y是OR¹⁸或NR¹⁹R²⁰；

Z是O或⁺NR²¹R²²；

R¹⁵、R¹⁶和R¹⁷各自独立地选自羟基、羧基、磺酸、硫羟或其盐、氢、卤素、可被取代的羧酸酯基团、硝基、胺、酰胺、可被取代的烷基、可被取代的烷氧基和可被取代的烯基；

条件是至少一个R¹⁷是间隔基团，染料通过该间隔基团共轭到粒子上；

R¹⁸是H或碱金属离子，

R¹⁹、R²⁰、R²¹和R²²各自独立地选自氢和可被取代的烷基，优选地，R¹⁹、R²⁰、R²¹和R²²各自相同；

f是0至3的整数；

g是0至3的整数；且

h是1至5的整数。