[发明专利]用于治疗纤维化和DNA损伤介导的疾病的RAGE蛋白

说明书

本发明涉及一种拟磷酸化RAGE蛋白质，其包含与天然哺乳动物RAGE同工型或其片段具有至少90％同一性的氨基酸序列，其中存在于哺乳动物RAGE同工型的胞质尾区中的至少一个丝氨酸被拟磷酸化结构替换。本发明进一步涉及编码拟磷酸化RAGE蛋白质的多核苷酸和包含该多核苷酸的载体。最后，本发明涉及包含运载体和选自RAGE蛋白质、载体的活性药物成分的组合物，该组合物用于治疗或预防患者的疾病，其中所述疾病优选选自由DNA修复受损引起的疾病、由DNA损伤增加引起的疾病或由衰老加剧引起的疾病。

技术领域

本发明涉及RAGE蛋白(例如拟磷酸化RAGE蛋白)及其在治疗DNA损伤介导的疾病，特别是纤维化中的用途。

背景技术

整个说明书中对背景技术的任何讨论绝不应被认为是承认该技术是本领域众所周知的或形成本领域公知常识的一部分。

人体的每个细胞每天都会遭受数十至上千的DNA损伤(Jackson and Bartek,2009；Ciccia and Elledge,2010)，其中DNA双链断裂(DSB)是DNA损伤的最具细胞毒性的形式。如果不进行修复，这些损伤会导致各种病症，例如癌症、神经退行性疾病、纤维化和免疫缺陷(Jackson and Bartek,2009；Aparicio et al.,2014；O’Driscoll,2012)。

通常，细胞通过一系列复杂的事件来应对这些断裂，通常称为DNA损伤应答(CDDR)，CDDR通过无错误的同源重组修复(HRR)途径或易出错的非同源的末端连接修复途径(NHEJ)来检测、信号传导和修复DSB(Branzei and Foiani,2008)。DSB导致DSB感应ATM激酶活化，然后磷酸化多个下游靶标，包括组蛋白变体H2AX和效应激酶CHK2(Matsuoka etal.,2007)。

因此，根据需要在时空上的修复信号传导的编排在保存遗传完整性方面起着重要作用。导致DNA DSB积累的DNA修复受损可能导致西方社会一些最具有破坏性的疾病，包括神经退行性疾病、肺纤维化和癌症。

已知RAGE是晚期糖基化终末产物(AGE)的受体(Schmidt et al.,1992)。AGE是糖部分非酶促添加到蛋白质的产物。在健康的组织中，RAGE以低基础水平表达。然而，RAGE的上调已与从动脉粥样硬化到阿尔茨海默氏病的各种病理事件有关(Bierhaus et al.,2005；Bierhaus and Nawroth,2009)，其中RAGE的有害作用已被视为配体-依赖性的。肺组织表达RAGE的最高基础水平，特别是在1型肺泡上皮细胞内，这表明RAGE在肺中可能起关键作用，这与其他表达RAGE的组织不同(Demling et al.,2006；Fehrenbach et al.,1998)。然而，RAGE在肺中的确切生理功能尚未完全了解。与传统上认为RAGE是纤维化的配体依赖性的促炎介质一致，He等人报道，纯合的RAGE缺陷小鼠(RAGE-/-)对博来霉素诱导的肺损伤具有抵抗力，具有提高的存活率和较低的纤维化评分。其表明了在用博来霉素处理后的RAGE-/-中，支气管肺泡灌洗液中促纤维化细胞因子TGFβ1和PDGF的蛋白质水平没有增加(He et al.,2007)。

已经针对RAGE提出了解决RAGE的促炎功能的不同治疗方法。在这些方法中，使用了RAGE的同工型，其称为可溶性RAGE。该同工型仅包含RAGE的细胞外区域。以这种形式，可溶性RAGE能够在RAGE配体与全长RAGE相互作用之前与该配体结合。由于这种能力，已经提出并销售了可溶性RAGE，其用作诱饵受体可以防止由于全长RAGE活化而产生的有害作用(Bierhaus et al.,2005；Bierhaus and Nawroth,2009)。