[发明专利]合成的生物缀合物

说明书

本发明提供了生物缀合物及其使用方法，该生物缀合物包含骨架和至少一个支链或非支链的肽，该肽具有至少一个通过间隔物共价结合至其的胶原结合单元。

相关申请的交叉引用

本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2017年07月07日提交的美国临时专利申请号62/530,047的利益，其公开内容通过引用整体并入本文。

技术领域

本发明提供包含骨架和至少一个支链肽或非支链肽的生物缀合物，该肽具有至少一个通过间隔物共价结合至其的胶原结合单元。

背景技术

在组织中，细胞被包含各种大分子的细胞外基质(ECM)包围，所述大分子例如是生物缀合物、胶原、透明质酸、层粘连蛋白、纤连蛋白等。在哺乳动物中，生物缀合物是细胞外基质的主要成分，在此它们与其他生物缀合物、透明质酸、以及纤维基质蛋白质(例如胶原)形成大的复合物。随着哺乳动物年龄增长和在某些疾病状态中，身体的某些部位(例如滑膜关节、玻璃体液、脊椎盘、皮肤等)中的细胞外基质会降解，引起不良的症状，例如各种形式的关节炎、视力丧失等。另外，诸如血管损伤、角膜损伤和皮肤伤口的一些组织损伤导致细胞外基质和/或其组分(包括胶原)的暴露。

发明概述

令人惊讶地发现，在聚糖和肽之间具有某些键的生物缀合物导致某些肽与它们的靶标结合增加。还发现具有支链肽会导致结合改善。具体地，具有某些间隔物的生物缀合物提供了增强的胶原结合活性。

本发明提供生物缀合物，其包含聚糖和至少一个共价结合至其的式(I)的结合单元：

((X¹)_mX²)_nX³-L

(I)

其中：

X¹是包含胶原结合单元的氨基酸序列；

X²和X³独立地为不存在的；具有1至15个氨基酸的氨基酸序列；或基团其中p和q每一个都独立地为1至10的整数；

L是5至20个氨基酸的间隔物，该氨基酸选自甘氨酸(G)、丝氨酸(S)、精氨酸(R)和赖氨酸(K)、或基团条件是L在从聚糖开始的前五个氨基酸内包含至少两个精氨酸(R)，并且其中L进一步包含将该肽共价结合至该聚糖的任选的连接基团；

m为1或2；并且

n为1或2。

在一个实施方式中，L不是GSGKRRGSG(SEQ ID NO:)。

在一个实施方式中，X¹为肽的N端，并且X³在肽的C端。

在一个实施方式中，式(I)不是RRRKKIQGRSKR(SEQ ID NO:)或RRGGRKWGSFEG(SEQID NO:)。

在一个实施方式中，所述连接基团是-NHNH-。

在一个实施方式中，本发明提供了下式的官能化的肽：

L-NHNH₂

其中L是5至20个氨基酸的间隔物，该氨基酸选自甘氨酸(G)、丝氨酸(S)、精氨酸(R)和赖氨酸(K)、或基团条件是L在从-NHNH₂基团开始的前五个氨基酸内包含至少两个精氨酸(R)。

在一个实施方式中，L是-GSGSGSRR-NHNH-(SEQ ID NO:)。本发明还提供包含GSGSGSRR(SEQ ID NO:)的肽。

本发明还提供式(II)的结合单元：