[发明专利]在真菌里氏木霉中恢复有性繁殖的方法

权利要求书

1.一种用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，包括以下步骤：

-a)在合适的培养基中孵育ΔMAT辅助菌株，所述菌株是其中已敲除MAT交配型基因座的里氏木霉雌性可育菌株，

-b)用第一交配型的第一里氏木霉菌株的分生孢子第一次浇灌所述ΔMAT辅助菌株，

-c)用第二交配型的第二里氏木霉菌株的分生孢子第二次浇灌来自步骤b)的所述ΔMAT辅助菌株。

2.根据权利要求1所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，其中所述第一交配型的第一里氏木霉菌株是MAT1-1或MAT1-2。

3.根据权利要求1所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，其中所述第二交配型的第二里氏木霉菌株是MAT1-1或MAT1-2。

4.根据权利要求1所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，其中所述里氏木霉菌株是QM6a菌株或衍生自QM6a菌株的菌株。

5.根据权利要求1所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，其中在合适的培养基中孵育所述ΔMAT辅助菌株的步骤a)持续至少2天。

6.根据权利要求1所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，其中在合适的培养基中孵育所述ΔMAT辅助菌株的步骤a)是在黑暗中孵育。

7.根据权利要求1所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，其中所述第一交配型的第一里氏木霉菌株的分生孢子和/或所述第二交配型的第二里氏木霉菌株的分生孢子以至少10⁵个分生孢子/ml的浓度存在。

8.根据权利要求1所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，在第一次浇灌和第二次浇灌之间另外还包括在合适的培养基中孵育来自步骤b)的所述ΔMAT辅助菌株的步骤。

9.根据权利要求8所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，其中步骤b)和在合适的培养基中孵育来自步骤b)的所述ΔMAT辅助菌株的步骤持续至少2天。

10.根据权利要求8或9所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，其中步骤b)和在合适的培养基中孵育来自步骤b)的所述ΔMAT辅助菌株的步骤在光照和黑暗交替下进行。

11.根据权利要求8所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，在第二次浇灌之后另外还包括在合适的培养基中孵育来自步骤c)的ΔMAT辅助菌株的步骤。

12.根据权利要求11所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，其中步骤c)和在合适的培养基中孵育来自步骤c)的所述ΔMAT辅助菌株的步骤持续至少5天。

13.根据权利要求11或12所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，其中步骤c)和在合适的培养基中孵育来自步骤c)的所述ΔMAT辅助菌株的步骤在光照和黑暗交替下进行。

14.根据权利要求11所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，在子座出现之后另外还包括扩增子座的步骤。

15.根据权利要求1所述的用于在两个里氏木霉雌性不育菌株之间恢复有性繁殖的方法，另外还包括获得里氏木霉菌株的步骤。