[发明专利]用于制备糖蛋白的细胞培养工艺

权利要求书

1.一种方法，其包括：

在包含大豆水解产物的细胞培养基中培养表达重组异源糖蛋白的细胞群以生产所述重组异源糖蛋白，其中所述大豆水解产物包含≤0.067％(w/w)鸟氨酸或腐胺。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞群是通过表达重组异源糖蛋白的细胞的克隆扩增而获得的。

3.如权利要求1-2中任一项所述的方法，其中所述大豆水解产物包含0.003％至0.027％(w/w)鸟氨酸或腐胺。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述培养基包含≤5mg/L鸟氨酸或腐胺。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述培养基包含0.6-3mg/L鸟氨酸或腐胺。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述糖蛋白是陷阱分子。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述陷阱分子选自下组，该组由以下组成：依那西普、利纳西普和阿柏西普。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述糖蛋白包含A1 N-聚糖和至少一种其他N-聚糖种类，其中A1 N-聚糖的相对量为所述糖蛋白的所有N-聚糖种类的总量的≥10％(w/w)。

9.一种方法，其包括：

a.在细胞培养基中培养表达糖基化蛋白的细胞以产生所述糖蛋白；

b.纯化所述糖基化蛋白；

c.对纯化的糖基化蛋白进行低聚糖指纹分析；

d.确定与所述糖蛋白的N-聚糖种类的总量相比的A1 N-聚糖的相对量；以及

e.选择提供与所述糖蛋白的N-聚糖种类的总量相比至少10％(w/w)A1 N-聚糖的大豆水解产物。

10.如权利要求9所述的方法，其中所选择的大豆水解产物包含≤0.067％(w/w)鸟氨酸或腐胺。

11.如权利要求9或10所述的方法，其中所选择的大豆水解产物包含0.003％-0.027％(w/w)鸟氨酸或腐胺。

12.如权利要求9-11中任一项所述的方法，其中所述培养基包含0.6-3mg/L鸟氨酸或腐胺。

13.如权利要求9-12中任一项所述的方法，其中所述糖蛋白是陷阱分子。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述陷阱分子选自下组，该组由以下组成：依那西普、利纳西普和阿柏西普。

15.如权利要求9-14中任一项所述的方法，其中所述糖蛋白包含每摩尔糖蛋白8-12摩尔唾液酸，或每摩尔糖蛋白35-65摩尔唾液酸。

16.一种选择用于制造糖蛋白的大豆水解产物的方法，所述方法包括：

a.测量大豆水解产物中鸟氨酸或腐胺的量；

b.选择具有≤0.067％(w/w)鸟氨酸或腐胺的大豆水解产物；以及

c.将所选择的大豆水解产物与其他成分组合，以形成具有≤5mg/L鸟氨酸或腐胺的细胞培养基。

17.如权利要求16所述的方法，其中所选择的大豆水解产物包含0.003％-0.027％(w/w)鸟氨酸或腐胺。

18.如权利要求16或17所述的方法，其中所述培养基包含0.6-3mg/L鸟氨酸或腐胺。

19.如权利要求16-18中任一项所述的方法，其中所述糖蛋白是陷阱分子。