[发明专利]用于使肿瘤细胞对自然杀伤细胞的杀灭敏感的新型溶瘤病毒

说明书

公开了工程化溶瘤病毒、相关融合蛋白和编码它们的多核苷酸，以及使用工程化病毒治疗癌症的方法。在一个方面，本文公开了工程化的溶瘤病毒，其中所述溶瘤病毒表达一种或多种外源性膜结合免疫细胞靶向配体，所述配体包含未切割的信号锚。

背景技术

溶瘤病毒(OVs)作为癌症治疗措施具有很好的前景。OVs选择性地在癌细胞中扩散并引起大量细胞病变效应。这些病毒感染的、濒死的癌细胞进一步募集免疫细胞如NK细胞或细胞毒性T细胞以“清除”逃脱病毒杀灭的感染癌细胞。然而，癌症患者经常具有受损的免疫系统，其不能完成杀灭和/或去除受感染的靶癌细胞的工作。因此，需要的是新的溶瘤病毒和使用可以提供改善的结果的所述细胞的方法。

发明内容

公开了涉及工程化或修饰的溶瘤病毒的方法和组合物。

在一个方面，本文公开了工程化的溶瘤病毒，其中所述溶瘤病毒表达一种或多种外源性膜结合免疫细胞靶向配体，所述配体包含未切割的信号锚。

本文还公开了包含未切割的信号锚结构域的融合蛋白，所述信号锚定结构域包含：胞质尾区、跨膜区和胞外茎区；和免疫细胞靶向配体，所述免疫细胞靶向配体包含与细胞外茎区的C末端融合的N末端。

在一个方面，本文公开了任一前述方面的溶瘤病毒和/或融合肽、多肽或蛋白质；其中所述一种或多种外源性膜结合免疫细胞靶向配体包含工程化免疫球蛋白Fc结构域、NK细胞受体NKG2D的蛋白激动剂(如例如RAET1、RAET1E、RAET1G、RAET1H、RAET1L、RAET1N、MICA、MICB)、对抗-CD19具有反应性的蛋白质表位(如CD19)和/或对抗-CD20具有反应性的蛋白质表位(如CD20)。

还公开了任一前述方面的溶瘤病毒和/或融合肽、多肽或蛋白质；其中所述外源性膜结合免疫细胞靶向配体是免疫球蛋白Fc结构域，并且所述免疫球蛋白Fc结构域(如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4 Fc结构域)被修饰成具有反向取向，其中氨基末端面向细胞内(即所述Fc在细胞表面的细胞外侧上表达，其N末端侧附着于细胞膜表面附近的膜锚肽，而不是N末端侧与细胞表面相距最大距离)。在一个方面，本文公开了任一前述方面的溶瘤病毒和/或融合肽、多肽或蛋白质；其中所述Fc结构域的N-末端与所述未切割的信号锚的胞外茎区的C-末端融合。

在一个方面，本文公开了工程化的溶瘤病毒，其中所述工程化的溶瘤病毒是融合溶瘤病毒。在一些方面，所述融合溶瘤病毒可以是修饰的或工程化的5型副流感病毒。还公开了任一前述方面的融合溶瘤病毒，其中所述融合溶瘤病毒包含编码允许使肿瘤细胞融合的超融合特性的肽的基因。在一个方面，溶瘤病毒被修饰或工程化以包含任一前述方面的融合肽、多肽或蛋白质。

还公开了任一前述方面的溶瘤病毒，其中所述溶瘤病毒被工程化以表达IL-2、IL-12、IL-18、IL-21或IL-15中的一种或多种。

在一个方面，本文公开了治疗癌症的方法，包括向受试者施用任一前述方面的工程化溶瘤病毒和/或融合肽、多肽或蛋白质。

还公开了任一前述方面的治疗癌症的方法，其中所述方法还包括过继转移抗体或免疫细胞(例如，NK细胞、遗传修饰的NK细胞和/或CAR T细胞)。

在一个方面，本文公开了任一前述方面的治疗癌症的方法，其中所述NK细胞被一种或多种NK细胞刺激剂，如例如细胞因子、生长因子、合成配体、NK细胞刺激颗粒、NK细胞刺激外来体或NK细胞刺激饲养细胞刺激和扩增。

附图说明

并入本说明书并构成本说明书一部分的附图示出了几个实施例，并与描述一起示出了所公开的组合物和方法。