[发明专利]T细胞抗原靶向的嵌合抗原受体(CAR)以及在细胞疗法中的用途

权利要求书

1.一种治疗癌症的方法，所述方法包括：

从受试者中分离T细胞；

修饰所述分离的T细胞，使得T细胞抗原的表达降低；

将载体插入所述T细胞中，其中在使得所述T细胞表达抗原识别结构域从而提供转导的T细胞的条件下，所述载体编码并表达包含所述T细胞抗原识别结构域的嵌合抗原受体，其中，与其中所述T细胞抗原的表达未改变或降低的T细胞相比，所述T细胞抗原的表达降低导致所述T细胞上包含所述T细胞抗原识别结构域的嵌合抗原受体的表达增加；以及

向所述受试者施用有效量的转导的T细胞，其任选地与IL-2组合施用于所述受试者。

2.如权利要求1的方法，其中所述T细胞抗原是CD5、CD7或CD3。

3.一种治疗癌症的方法，所述方法包括：

从受试者中分离T细胞；

修饰所述分离的T细胞，使得CD5的表达降低；

将载体插入所述T细胞，其中在使得所述T细胞表达CD5抗原识别结构域从而提供转导的T细胞的条件下，所述载体编码并表达包含所述CD5抗原识别结构域的嵌合抗原受体；以及

向所述受试者施用有效量的转导的T细胞，其任选地与IL-2组合施用于所述受试者。

4.如权利要求3所述的方法，其中，与其中所述CD5的表达未改变或降低的T细胞相比，CD5的表达降低导致所述T细胞上包含CD5抗原识别结构域的嵌合抗原受体的表达增加。

5.如权利要求3所述的方法，其中修饰所述分离的T细胞使得CD5的表达降低包括将载体插入所述T细胞中，其中所述载体编码并表达Cas核酸酶和指导RNA，所述指导RNA靶向用于切割、切开或阻断所述CD5基因或CD5 mRNA的表达的序列。

6.如权利要求5所述的方法，其中所述指导RNA包含AGCGGTTGCAGAGACCCCAT(SEQ IDNO:5)。

7.如权利要求3所述的方法，其中修饰所述分离的T细胞使得CD5的表达降低包括将mRNA插入所述T细胞中，其中所述mRNA编码Cas核酸酶和指导RNA，所述指导RNA靶向用于切割或切开CD5基因或CD5 mRNA的序列。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述指导RNA包含AGCGGTTGCAGAGACCCCAT(SEQ IDNO:5)。

9.如权利要求3所述的方法，其中修饰所述分离的T细胞使得CD5的表达降低包括将载体或mRNA插入所述T细胞中，其中所述载体或mRNA编码并表达能够减少CD5 mRNA表达的短发夹RNA。

10.如权利要求3所述的方法，其中修饰所述分离的T细胞使得CD5的表达降低包括将双链RNA寡核苷酸插入所述T细胞中，其中所述RNA能够通过RNA干扰(RNAi)降低CD5 mRNA表达。

11.如权利要求3所述的方法，其中所述T细胞从所述受试者的自体外周血淋巴细胞(PBL)获得。

12.如权利要求3所述的方法，其中在向所述受试者施用淋巴细胞去除方案之后，向所述受试者施用有效量的转导的T细胞。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述淋巴细胞去除方案是非清髓性的。

14.如权利要求12所述的方法，其中所述淋巴细胞去除方案包括施用环磷酰胺、氟达拉滨或其组合。