[发明专利]T细胞抗原靶向的嵌合抗原受体(CAR)以及在细胞疗法中的用途

说明书

本公开涉及包含靶向的嵌合抗原受体的工程改造的细胞，诸如T细胞。在某些实施方案中，当T细胞抗原的内源性表达在所述T细胞中被敲低或降低时，T细胞靶向的嵌合抗原受体(CAR)以更高的水平表达。在某些实施方案中，所述工程改造的细胞是，与其中所述T细胞抗原的表达未改变或降低的类似定位的免疫调节细胞相比，在使得降低T细胞抗原表达导致嵌合抗原受体表达增加的条件下，经遗传修饰以阻止或减少T细胞抗原表达的免疫调节细胞，或含有降低或敲低T细胞mRNA表达的核酸的免疫调节细胞。在某些实施方案中，T细胞抗原包括但不限于CD5、CD7和CD3。

相关申请的交叉引用

本申请要求2017年6月12日提交的美国临时申请号62/518,588的权益。此申请的全部内容特此出于所有目的以引用的方式并入。

关于联邦政府资助的研究或开发的声明

本发明是在美国国立卫生研究院授予的授权1R43CA192710-01在政府支持下完成的。政府对本发明享有某些权利。

经由办公室电子提交系统(EFS-WEB)以文本文件形式提交的材料的参考引用

与本申请相关联的序列表以文本文件格式代替纸质副本提供，并且特此以引用的方式并入本说明书中。含有序列表的文本文件的名称是17172PCT_ST25.txt。文本文件是11KB，在2018年6月12日创建，并且经由EFS-Web电子提交。

背景

遗传修饰的T细胞的过继转移是产生抗肿瘤免疫应答的有前途的方法。据报道，在施用制备性化疗方案后，经过遗传工程改造以表达能够识别B细胞抗原CD19的嵌合抗原受体(CAR)的自体T细胞可使淋巴瘤消退。Kochenderfer等,Blood.2010,116(20):4099-102。然而，由于缺乏T淋巴母细胞特异性表面抗原，T细胞恶性肿瘤的治疗变得复杂。因此，产生靶向恶性T细胞的CAR T细胞有被杀死的危险，即CAR T细胞自毁。因此，它们针对靶向的癌症T细胞的活化受到损害。因此，需要确定改进的方法。

CD5是泛T细胞标志物，其常常在大多数T细胞恶性肿瘤中过表达。正常细胞的CD5表达被认为仅限于胸腺细胞、外周血T细胞和被称为B-1细胞的B淋巴细胞小亚群。Chen等报道使用抗CD5嵌合抗原受体的攻击性T细胞恶性肿瘤的临床前靶向。Leukemia,2017,31(10):2151–2160。此报道表明由于固有的CD5表达，在工程改造的CAR T细胞中存在杀伤行为。还参见Mamonkin等,Blood.2015,126(8):983–92、WO 2016/172606、WO 2016/138491、WO2017/146767和标题为Autologous T-Cells Expressing a Second Generation CAR forTreatment of T-Cell Malignancies Expressing CD5 Antigen(MAGENTA)的ClinicalTrials.gov Identifier NCT03081910。

本文引用的参考文献不是对现有技术的承认。

发明内容

本公开涉及包含靶向的嵌合抗原受体的工程改造的细胞，诸如T细胞。在某些实施方案中，当T细胞抗原的内源性表达在所述T细胞中被敲低或降低时，T细胞靶向的嵌合抗原受体(CAR)以更高的水平表达。在某些实施方案中，所述工程改造的细胞是，与其中T细胞抗原的表达未改变或降低的类似定位的免疫调节细胞相比，在使得降低T细胞抗原表达导致嵌合抗原受体表达增加的条件下，经遗传修饰以阻止或降低T细胞抗原表达的免疫调节细胞，或含有降低或敲低T细胞mRNA表达的核酸的免疫调节细胞。在某些实施方案中，T细胞抗原包括但不限于CD5、CD7和CD3。