[发明专利]产物的制造方法

说明书

本发明提供一种产物的制造方法。本发明的技术所涉及的产物的制造方法包括：将培养容器内的细胞的浓度设为3×10⁷cells/ml以上且3×10⁸cells/ml以下的步骤；将培养容器内的细胞单体的平均直径设为A时，在培养容器内，将细胞单体的直径为1.4×A以上的细胞的数量比例设为5％以下的步骤；以及将细胞单体的直径在A±A/7的范围内的细胞的数量比例设为50％以上的步骤。

技术领域

公开的技术涉及一种由细胞生成的产物的制造方法。

背景技术

在包含由细胞生成的抗体的生物医药品等的制造中，已知为了提高抗体的生产率，一边从培养容器中连续地提取包含抗体的培养基，一边连续地向培养容器供给新鲜的培养基的灌注培养。

作为关于灌注培养的技术，例如在日本特表2014-507959号公报中记载有与平均细胞直径的增加相关联地观察到不充分的细胞增殖。

并且，在Characterization and comparison of ATF and TFF in stirred bioreactors for continuous mammalian cell culture processes(Biochemical Engineering Journal(生化工程杂志)110(2016)17-26)中记载有在使用了磁悬浮型泵的培养中，可获得与ATF(Alternating Tangential Flow Filtration，交替切向流过滤)隔膜式往复泵相同的培养结果。

发明内容

发明要解决的技术课题

通过灌注培养能够进行细胞的高浓度培养，由细胞生成的抗体等的产物的生产率提高。然而，存在若培养容器内的细胞的浓度变高，则细胞的活力下降或由细胞生成的产物的品质下降的问题。

本发明的一实施方式在维持基于细胞的高浓度培养的产物的生产率的同时，提高产物的品质。

用于解决技术课题的手段

公开的技术所涉及的产物的制造方法为通过容纳于培养容器的细胞生成的产物的制造方法，其包括：将培养容器内的细胞的浓度设为3×10⁷cells/ml以上且3×10⁸cells/ml以下的步骤；将培养容器内的细胞单体的平均直径设为A时，在所述培养容器内，将细胞单体的直径为1.4×A以上的细胞的数量比例设为5％以下的步骤；以及在培养容器内，将细胞单体的直径在A±A/7的范围内的细胞的数量比例设为50％以上的步骤。

通过对容纳于培养容器的细胞赋予外力，可以选择性地削减细胞单体的直径为1.4×A以上的细胞。优选将培养容器内的细胞单体的直径的标准偏差设为A/4以下。

公开的技术所涉及的产物的制造方法能够包括：进行将使用泵从培养容器中提取的细胞悬浮液分离为细胞浓缩而成的细胞浓缩液、及具有比所述细胞悬浮液的细胞浓度低的细胞浓度的液体的分离处理的工序；使所述细胞浓缩液返回到培养容器的工序；以及向培养容器内供给新鲜培养基的工序。上述泵可为使浮动在细胞悬浮液中的旋转叶片通过磁力进行旋转的磁悬浮型泵，通过将基于由泵产生的液流的外力赋予细胞，可以选择性地削减细胞单体的直径为1.4×A以上的细胞。

优选在将旋转叶片的直径设为D米，将旋转叶片的尖端与包围旋转叶片的周围的内壁的距离设为L米，将旋转叶片每一秒的转速设为R，将圆周率设为π，将细胞悬浮液的粘度设为X帕斯卡秒，将所述泵的送液压力设为P帕斯卡且设为Y＝X×D×π×R/L时，满足2000≤10000Y+P≤80000且3≤log₁₀(P/Y)≤5.6。Y相当于通过泵的旋转叶片的旋转来作用于细胞悬浮液的剪切应力。并且，优选满足0.1≤Y≤3，且优选满足500≤P≤80000。