[发明专利]T细胞受体缺陷型嵌合抗原受体T细胞和其使用方法

权利要求书

1.一种工程化CD3/TCRαβ阴性T细胞，其包括多肽，所述多肽包括连接到定位结构域的靶结合分子，

其中所述靶结合分子包括结合CD3/TCRαβ复合蛋白的抗体，

其中所述定位结构域包括保留信号传导结构域，所述保留信号传导结构域包括选自由以下组成的组的氨基酸序列：内质网(ER)保留序列、高尔基体保留序列和蛋白酶体定位序列，并且

其中连接到所述定位结构域的所述靶结合分子不是由所述工程化细胞分泌的，并且不在所述工程化细胞的细胞表面上表达。

2.根据权利要求1所述的工程化T细胞，其中所述CD3/TCRαβ复合蛋白选自由以下组成的组：TCRα、TCRβ、CD3ε、CD3δ、CD3γ和CD3ζ。

3.根据权利要求1或2所述的工程化免疫细胞，其中所述抗体是单链可变片段(scFv)。

4.根据权利要求3所述的工程化T细胞，其中所述scFv包括与SEQ ID NO:1具有至少95％序列同一性的可变重链(V_H)序列和与SEQ ID NO:2具有至少95％序列同一性的可变轻链(V_L)序列。

5.根据权利要求1到4中任一项所述的工程化T细胞，其中所述工程化T细胞是同种异体T细胞。

6.根据权利要求1到4中任一项所述的工程化T细胞，其中所述工程化T细胞是自体T细胞。

7.根据权利要求1到6中任一项所述的工程化T细胞，其中所述定位结构域进一步包括跨膜结构域，所述跨膜结构域选自衍生自以下的跨膜结构域：CD8α、CD8β、4-1BB、CD28、CD34、CD4、FcεRIγ、CD16、OX40、CD3ζ、CD3ε、CD3γ、CD3δ、TCRα、CD32、CD64、VEGFR2、FAS或FGFR2B。

8.根据权利要求1到7中任一项所述的工程化T细胞，其中所述ER保留序列包括选自以下的氨基酸序列：KDEL(SEQ ID NO:32)、KKMP(SEQ ID NO:33)、KKTN(SEQ ID NO:43)或KKXX，其中X是任何氨基酸(SEQ ID NO:35)。

9.根据权利要求1到8中任一项所述的工程化T细胞，其中CD3/TCRαβ表达在所述工程化T细胞中被阻断。

10.一种治疗有需要的患者中的自身免疫性疾病或病毒性疾病的方法，其包括向患有自身免疫性疾病或病毒性疾病的所述患者施用治疗有效量的包括根据权利要求1到9中任一项所述的工程化T细胞的药物组合物。

11.一种降低或消除患者中的移植物抗宿主病的可能性的方法，其包括向所述患者施用治疗有效量包括根据权利要求1到9中任一项所述的工程化T细胞的药物组合物。

12.根据权利要求1到9中任一项所述的工程化T细胞，其中所述工程化T细胞进一步包括嵌合抗原受体(CAR)。

13.根据权利要求12所述的工程化T细胞，其中所述CAR包括抗CD19scFv结构域、4-1BB刺激性信号传导结构域和CD3ζ信号传导结构域。

14.根据权利要求13所述的工程化T细胞，其中所述工程化T细胞诱导CD19+癌症细胞的细胞毒性。

15.根据权利要求12所述的工程化T细胞，其中所述CAR包括抗CD3scFv结构域、4-1BB刺激性信号传导结构域和CD3ζ信号传导结构域。

16.根据权利要求15所述的工程化T细胞，其中所述工程化T细胞诱导CD3+癌症细胞的细胞毒性。