[发明专利]利用疏水相互作用分离细胞外囊泡的方法

权利要求书

1.一种分离细胞外囊泡的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)将疏水性官能团固定在固定相上；

(b)将含有细胞外囊泡的样品上样至固定相，使细胞外囊泡与疏水性官能团结合；

(c)洗去固定相上未结合疏水性官能团的残留的剩余样品；和

(d)从固定相洗脱结合至疏水性官能团的细胞外囊泡。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括在步骤(b)之前用含有盐析离子的溶液洗涤其上具有疏水性官能团的固定相的步骤。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述盐析离子具有适于控制所述固定相的疏水性以使所述细胞外囊泡结合至所述固定相的浓度。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述盐析离子的浓度范围为0M至10M。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括以下步骤：在将含有细胞外囊泡的样品上样至固定相的步骤(b)之前，将含有盐析离子的溶液添加到所述样品中，以改变所述样品中含有的盐析离子的种类或浓度。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括在洗脱细胞外囊泡的步骤(d)之前，控制盐析离子的种类或浓度以除去疏水相互作用强度小于细胞外囊泡的物质的步骤。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，用于除去疏水相互作用强度小于细胞外囊泡的物质的所述盐析离子的浓度被控制在0M至10M的范围内。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述盐析离子选自硫酸盐、磷酸盐、氢氧化物、氟化物、甲酸盐、乙酸盐、氯化物、溴化物、硝酸盐、碘化物、硫氰酸盐、柠檬酸盐和酒石酸盐组成的群组中的至少一种。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述固定相选自由琼脂糖珠、琼脂糖凝胶珠、葡聚糖珠、二氧化硅珠、磁珠、金纳米颗粒、银纳米颗粒、氧化铁纳米颗粒、尼龙膜、硝酸纤维素膜、PVDF膜、纸、塑料、玻璃和金属传感器芯片组成的群组中的至少一种。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述疏水性官能团选自由丁基、氰基丁基、辛基、苯基和联苯组成的群组中的至少一种。

11.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品选自由哺乳动物细胞培养物、细菌细胞培养物、酵母培养物、组织提取物、癌组织、血清、血浆、唾液、泪液、鼻粘液、汗液、尿液、粪便、脑脊液、腹水、羊水、支气管肺泡灌洗液、胸腔积液、精液、牛奶、灰尘、淡水、海水、土壤和发酵食品组成的群组中的至少一种。

12.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括在将含有细胞外囊泡的样品上样至固定相的步骤(b)之前，对所述含有细胞外囊泡的样品进行预处理的步骤。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述预处理的步骤为实施选自离心、超离心、过滤、超滤、透析、脱盐柱层析、超声处理、密度梯度离心、尺寸排阻层析、离子交换层析、亲和层析、沉淀和双液相体系中的一个技术。

14.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括对来自步骤(d)的洗脱液中的细胞外囊泡进行后处理的步骤。

15.权利要求14所述的方法，其特征在于，所述后处理的步骤为实施选自离心、超离心、过滤、超滤、透析、脱盐柱层析、超声处理、密度梯度离心、尺寸排阻层析、离子交换层析、亲和层析、沉淀和双液相体系中的一个技术。

16.利用权利要求1至15中任一项中所述的方法分离的细胞外囊泡。