[发明专利]单采血液分离方法和用途

说明书

提供了治疗需要治疗由于蛋白质的功能或活性丧失引起的疾病的受试者的方法。还提供了治疗需要治疗由蛋白质的功能、活性或表达引起的疾病的受试者的方法。

相关申请

本专利申请要求2017年7月17日提交的美国专利申请No.62/533,579的优先权的权益。前述申请的全部内容通过引用并入本文，包括所有文本、表格、附图和序列。

背景技术

使用重组腺相关病毒(rAAV)的基因治疗(基因转移)已显示出有望解决未满足医疗需求的潜力。例如，在人类临床试验中，使用表达凝血因子VIII和IX的AAV的基因治疗已显示出有望的安全性和有效性(参考文献)。

AAV感染在人群中很常参见，并且不知道会引起什么疾病。可能从基于AAV的基因治疗中受益的大多数人类受试者先前已感染AAV。虽然感染可能会在后面生命中发生，然而最常见的是在儿童时期发生。与任何病毒感染一样，宿主对AAV感染的免疫反应导致形成针对AAV的抗体(AAV抗体)。暴露于AAV后，快速形成AAV抗体的时间过程(几周)，达到高滴度的抗体峰，然后AAV抗体水平逐渐下降(年)是众所周知的(参考文献)。在AAV感染后，AAV抗体的典型峰滴度＞1：100，并且很容易超过1：1000(Calcedo et al,2009)。

迄今为止，在有希望的血友病临床研究中(George et al 2016,AmericanSociety for Hematology,San Diego CA,Plenary Lecture；George et al 2017,International Society for Thrombosis and Hemostasis,Berlin,Germany)，将表达治疗性转基因(FVIII或FIX)的AAV载体系统(例如静脉内)施用给没有预先存在抗体(滴度1：1)的人类受试者后，观察到了最佳结果。滴度非常低的预先存在抗体(1：1-1：2)也可以得到良好的结果，滴度低的预先存在抗体(1：3-1：5)可以得到适度的结果。超过这些水平的预先存在的抗体水平对应于差的基因转导。这种基因转移效率随预先存在的抗体滴度而下降的机制，是通过预先存在的抗体对AAV基因治疗载体的结合和中和作用。当与抗AAV抗体结合时，阻止载体到达和转导靶组织和细胞，例如肝脏细胞，包括肝细胞和内皮细胞，这是治疗性基因转移的靶标。根据特定的AAV血清型，血友病患者中，多达50％甚至超过50％的患者可能因基于AAV抗体的预先存在而不能从基于AAV的基因治疗中受益(Calcedo et al2009)。

发明内容

本文所公开的方法和用途，以在预期哺乳动物(可能受益于AAV基因治疗的诸如人类受试者)中去除、消耗、捕获和/或灭活AAV抗体。在某些方面，AAV抗体以降低或阻断靶细胞的治疗性基因转移载体转导的水平存在。在某些方面，AAV抗体是预先存在的并且可以降低或阻断靶细胞的治疗性基因转移载体转导的水平存在。在某些方面，AAV抗体可在暴露于AAV或施用用于基因治疗的AAV载体后形成。如果在给予用于基因治疗的AAV载体后产生此类抗体，则也可以根据本发明治疗这些受试者。

该方法基于医疗设备/程序，通常称为单采血液分离，更具体地讲，涉及血液产物的血浆置换。在某些实施例中，单采血液分离用于使AAV基因治疗受益，特别是在具有预先存在的AAV抗体或在基因治疗后发展出AAV抗体的受试者中。

一般来说，单采血液分离或血浆置换是一种过程，在该过程中，人类的血浆通过一种装置进行离体循环(体外)，该装置通过在血浆返回患者之前添加、去除和/或替换成分来修饰血浆。血浆置换可以用于从血液产物(例如血浆)中去除人免疫球蛋白(例如IgG、IgE、IgA、IgD)。该程序消耗、捕获、灭活、减少或去除与AAV结合的免疫球蛋白(抗体)，从而降低了受治疗受试者中AAV抗体的滴度，从而减少了可能有助于AAV中和的AAV抗体。可用于实施本发明的装置可以是AAV衣壳亲和基质的形式。通过AAV衣壳亲和基质传递人类受试者的血液产物(例如血浆)将只导致AAV抗体与所有同种型(包括IgG，IgM等)结合。