[发明专利]气味的定量方法、其所使用的细胞及该细胞的制造方法在审
申请号: | 201880060338.2 | 申请日: | 2018-08-16 |
公开(公告)号: | CN111344406A | 公开(公告)日: | 2020-06-26 |
发明(设计)人: | 黑田俊一 | 申请(专利权)人: | 株式会社香味醗酵 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12M1/00;C12N1/15;C12N1/19;C12N5/071;C12N5/10;C12N15/12;C12Q1/02;G01N21/64 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 杨宏军 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 气味 定量 方法 使用 细胞 制造 | ||
1.阵列,其包含基板、和所述基板上的疏水性被膜,
所述疏水性被膜具有多个贯通孔,
在所述贯通孔的内部,以与所述基板接触的方式设置有含有编码规定的受体的基因的核酸。
2.如权利要求1所述的阵列,其中,在每个所述贯通孔中,设置有不同的所述含有编码规定的受体的基因的核酸。
3.如权利要求1或2所述的阵列,其中,所述多个贯通孔的截面积平均值为0.125mm2以上且0.283mm2以下。
4.如权利要求3所述的阵列,其中,在所述基板中设置有200个以上的所述贯通孔,并且所述贯通孔彼此的平均间距为0.6mm以上且O.8mm以下。
5.如权利要求1~4所述的阵列,其中,所述疏水性被膜于23℃时与水的接触角为70°以上。
6.如权利要求1~5所述的阵列,其中,所述规定的受体包括G蛋白结合受体。
7.如权利要求6所述的阵列,其中,所述G蛋白结合受体包括嗅觉受体。
8.如权利要求1~7所述的阵列,其还在所述每1个贯通孔中容纳有多个真核细胞。
9.真核细胞,其表达CNGA2及GNAL或它们的突变体作为外源基因。
10.如权利要求9所述的细胞,其还表达CNGA4及/或CNGB1b或它们的突变体作为外源基因。
11.如权利要求9或10所述的细胞,其还表达编码下述蛋白质的基因,所述蛋白质能够使在所述细胞中表达的嗅觉受体从内质网膜转移至细胞膜,使所述嗅觉受体向所述细胞表面呈递的效率提高。
12.载体,其是选自由下述载体组成的组中的至少1种:
(1)载体A,其具有编码CNGA2及GNAL或它们的突变体的基因;
(2)载体B,其具有编码CNGA4及/或CNGB1b或它们的突变体的基因;及
(3)载体C,其具有编码下述蛋白质的基因,所述蛋白质能够使在细胞中表达的嗅觉受体从内质网膜转移至细胞膜,使所述嗅觉受体向所述细胞表面呈递的效率提高。
13.真核细胞,其整合有权利要求12所述的至少1种载体。
14.真核细胞,其在权利要求9~11、或13中任一项所述的细胞的染色体上具有一定个数的、用于整合编码来源于哺乳类的嗅觉受体的基因的区域。
15.真核细胞,其在权利要求14所述的所述区域中整合有人源嗅觉受体基因。
16.如权利要求8所述的阵列,其中,所述真核细胞为权利要求9~11、或13~15所述的真核细胞。
17.方法,其是计算基于被测物质的对规定的受体的活化度的方法,所述方法包括下述步骤:
(1)测定在使表达所述受体的多个真核细胞与所述被测物质接触时被摄入所述各个细胞内的离子量的步骤;
(2)测定将与所述步骤1中用于测定的细胞相同的细胞去极化时所述各个细胞内的离子量的步骤;及
(3)计算所述步骤1中测得的数值与所述步骤2中测得的数值之比的步骤。
18.如权利要求17所述的方法,其中,在所述步骤1及所述步骤2中,
测定被摄入细胞内的离子量的手段为使用色素的手段、或使用荧光结合蛋白的手段。
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