[发明专利]干细胞衍生的胰腺β细胞的重聚

权利要求书

1.一种体外细胞簇，其包含至少一种非天然胰腺β细胞，所述非天然胰腺β细胞在暴露于葡萄糖负荷时表现出体外葡萄糖刺激的胰岛素分泌应答，其中所述细胞簇是未分选的细胞簇，并且其中所述细胞簇包含：

(a)至少约35％的表达NKX6.1和C肽的细胞；

(b)至少约70％的表达嗜铬粒蛋白A的细胞；

(c)至多约2％的表达SOX2的细胞；或者

(d)至多约10％的表达SOX9的细胞。

2.一种体外细胞簇，其包含至少一种不包含荧光蛋白的NKX6.1⁺和C肽⁺细胞，其中所述细胞簇在暴露于葡萄糖负荷时表现出体外葡萄糖刺激的胰岛素分泌应答，并且其中所述细胞簇包含：

(a)至少约35％的表达NKX6.1和C肽的细胞；

(b)至少约70％的表达嗜铬粒蛋白A的细胞；

(c)至多约2％的表达SOX2的细胞；或者

(d)至多约10％的表达SOX9的细胞。

3.根据权利要求1所述的细胞簇，其中所述至少一种NKX6.1⁺和C肽⁺细胞是非天然胰腺β细胞，其在暴露于葡萄糖负荷时表现出体外葡萄糖刺激的胰岛素分泌应答。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的细胞簇，其包含至少约35％的表达NKX6.1和C肽的细胞。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的细胞簇，其包含至少约40％或至少约60％的表达NKX6.1和C肽的细胞。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的细胞簇，其包含至少约70％的表达嗜铬粒蛋白A的细胞。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的细胞簇，其包含至少约80％、至少约90％、至少约95％或100％的表达嗜铬粒蛋白A的细胞。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的细胞簇，其包含至多约2％的表达SOX2的所述细胞簇中的细胞。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的细胞簇，其包含至多约1.5％、至多约1％或至多约0.5％的表达SOX2的细胞。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的细胞簇，其包含至多约10％的表达SOX9的细胞。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的细胞簇，其包含至多约5％、至多约3％或至多约2％的表达SOX9的细胞。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的细胞簇，其包含至多约2％、至多约1％、至多约0.5％或至多约0.1％的表达Ki67的细胞。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的细胞簇，其中所述体外细胞簇具有约150μm的直径。

14.根据权利要求1-12中任一项所述的细胞簇，其中所述体外细胞簇具有约50μm至约250μm的直径。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的细胞簇，其中所述体外细胞簇具有约100μm至约200μm的直径。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的细胞簇，其中与第二葡萄糖浓度相比，所述体外细胞簇响应于第一葡萄糖浓度表现出更高的胰岛素分泌，其中所述第一葡萄糖浓度高于所述第二葡萄糖浓度。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的细胞簇，其中所述体外细胞簇进一步包含至少一种表达胰高血糖素的细胞或至少一种表达促生长素抑制素的细胞。