[发明专利]用于防止细胞培养收获物中的二硫键还原的方法在审
| 申请号： | 201880064307.4 | 申请日： | 2018-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN111182922A | 公开（公告）日： | 2020-05-19 |
| 发明（设计）人： | K.夸恩特 | 申请（专利权）人： | 拜耳医药保健有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/395 | 分类号： | A61K39/395 |
| 代理公司： | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人： | 张文辉 |
| 地址： | 美国新*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 防止 细胞培养 收获 中的 二硫键 还原 方法 | ||
1.用于防止重组宿主细胞中表达的多肽中二硫键还原的方法，其包括在发酵后将磷酸盐添加到所述重组宿主细胞的收获物溶液，其中所述多肽中的所述二硫键保持非还原的。
2.权利要求1的方法，其中所述多肽包括抗体。
3.权利要求1的方法，其中所述多肽包括抗体的生物学功能片段。
4.权利要求1的方法，其中所述宿主细胞包括真核细胞。
5.权利要求4的方法，其中所述真核细胞包括哺乳动物细胞。
6.权利要求5的方法，其中所述哺乳动物细胞包括中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。
7.权利要求1的方法，其中将磷酸盐添加到所述收获物溶液以制备范围为10-1000毫摩尔的终溶液。
8.权利要求1的方法，其中将所述磷酸盐添加到所述收获物溶液以制备范围为10-300毫摩尔的终溶液。
9.权利要求1的方法，其中所述磷酸盐包括选自下组的磷酸盐：磷酸钙、磷酸钠和磷酸钾。
10.如权利要求2所述的方法，其进一步包含IgG抗体。
11.如权利要求10所述的方法，其中所述IgG抗体包括IgG2。
12.如权利要求10所述的方法，其中所述IgG抗体包括IgG1。
13.如权利要求10所述的方法，其中所述IgG抗体包括IgG4。
14.权利要求1-3的方法，其进一步包括从收获的细胞培养液(HCCF)中回收所述多肽。
15.权利要求1-3的方法，其进一步包括从收获的细胞培养液(HCCF)中纯化所述多肽。
16.如权利要求1所述的方法，其中所述磷酸盐是：
(a)呈五水合物形式或无水形式；
(b)以10-1000毫摩尔之间的浓度添加；
(c)以10-300毫摩尔之间的浓度添加；
(d)以10-100毫摩尔之间的浓度添加；或
(e)以所述收获前或收获的培养液中磷酸盐浓度的至少约两倍的浓度添加。
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