[发明专利]使用非靶向质谱平台检测的生化物质的分析验证的简化方法

说明书

本发明描述了一种评估使用多分析物测定法测量的生化物质的分析性能的方法。该方法包括分析验证样品中第一生化物质的水平的测量值，其中第一生化物质先前已针对三个或更多个分析验证条件进行了分析验证；测量样品中第二生化物质的水平，其中第二生化物质与第一生化物质在结构或生化上相关；和比较第一生化物质的验证参数和第二生化物质的验证参数，以基于比较结果确定第二生化物质的性能是否是可接受的。

背景

代谢组学分析(全局生化分析)是一种大规模的半定量方法，其检查与生化异常相关的干扰，例如在氨基酸、碳水化合物、有机酸、脂质和核苷酸代谢方面的干扰。该测试使用色谱和质谱(例如GC-MS和LC-MS/MS)技术的组合同时分析数千种化合物。代谢组学分析可用作具有例如未分化表型的个体的筛查工具，或用作在与代谢过程相关的基因中具有可疑的突变的个体中的支持证据。

例如，对先天性代谢错误(IEM)领域的生化筛选研究已显示了代谢组学分析方法的临床意义和实用性(Miller,MJ等人，J Inherit Metab Dis.2015Nov；38(6):1029-39)。与临床诊断试剂盒提供的有限的生化分析相比，对例如血浆、血清、尿液和脑脊液的样品类型中的人代谢组的筛选已经显示出提供有益信息的和新颖的代谢特征。使用代谢组学分析方法生成生化表型的能力提供了额外的分析工具来检测代谢物产生的异常水平，其能够与靶向定量生化测定法结合使用。重要的是，全局生化分析鉴定和测量临床诊断试剂盒中当前未监测的生化物质的水平，这已经强调了全局代谢组学分析作为监测各种临床相关生化物质的工具的实用性。

在将测试或测定法能够用于临床环境之前，必须满足某些监管要求。除了临床验证和临床实用性之外，还必须证明分析验证。用于验证临床应用的生化物质的传统方法需要通过评估多种条件来对每种生化物质进行完全分析验证，这些条件包括例如单日精度(日内精度)、多日精度(日间精度)、检测限(LOD)、线性、稳定性、携流效应、基体效应/生化回收、干扰以及通过相关性分析与当前使用的标准临床检测进行比较。

实验已经证明，全局代谢组学分析是评估健康和诊断疾病的有用方法。然而，针对生化分析物的分析验证的所有验证条件在代谢组学分析中对所有生化物质进行分析验证的过程非常耗时且耗费资源，由于必须评估并满足充分的分析参数以满足分析验证的监管要求，这限制了在临床环境中代谢组学分析方法的使用。已经提出了允许测量一种化合物的水平的定量方法，其基于具有与第一种化合物相似的化学特性的化合物的内标的水平来进行测量(CLSI.Mass Spectrometry in the Clinical Laboratory:General Principlesand Guidance；Approved Guideline.CLSI document C50-A.Wayne,PA:Clinical andLaboratory Standards Institute；2007)。但是，该方法需要校准标准品和内标才能准确地定量化合物。因此，其在全局代谢组学分析的分析验证中的应用受到能够与使用代谢组学技术测量的大量化合物同时分析的内标的数量的限制。

概述

为了完全满足定义的验证条件，生化测定法的分析验证常规地对单个分析物或由有限数量的分析物组成的多分析物组的定量测定法进行。通常，多分析物组由少于50种分析物组成。但是，这种完全分析验证方法对于包含数十到数百或数千种分析物的半定量多分析物组不可行。为了使半定量全局代谢组学测定法能够用于评估人健康，需要一种简化方法来分析验证在这些测定法中测量的大量分析物，而无需对每种分析物进行完全分析验证。

在所述方法中，使用简化的一组分析验证条件来评估和验证生化物质在测定法中的分析性能。在一些实施方案中，生化物质与已经被完全分析验证的另一种代谢物在结构上相关。在一些实施方案中，生化物质与已经被完全分析验证的另一种代谢物在生化上相关。