[发明专利]可前药化抗体、其前药以及使用和制备方法

权利要求书

1.一种根据式(I)的前药化抗体

(BM-L)_m-Ab (I)

其中

Ab是一种抗体，其重链可变区或轻链可变区中有至少一个氨基酸被Cys替换，其中被替换的氨基酸(a)在框架区中；(b)具有至少30％的侧链暴露；且(c)距离CDR氨基酸内，优选内；

BM是抑制Ab与其抗原结合的封闭部分；

每个L独立地是与BM和Ab键合的接头部分，L包含可切割部分且在前述Cys处与Ab键合；且

M是1、2、3或4。

2.根据权利要求1所述的前药化抗体，其中抗体Ab中的所述至少一个被替换的氨基酸位于所述重链可变区的Kabat位置1、3、5、19、23、25、43、46、68、72、74、75、76、82a、82b、83、84、85或105处，或者位于所述轻链可变区的Kabat位置1、3、5、7、8，18、20、45、57、60、63、65、66、67、69、77或100处。

3.根据权利要求1所述的前药化抗体，其中抗体Ab中的所述至少一个被替换的氨基酸位于所述重链的Kabat位置23处或所述轻链的Kabat位置67处。

4.根据权利要求1所述的前药化抗体，其中抗体Ab中的所述至少一个被替换的氨基酸位于所述重链的Kabat位置23处。

5.根据权利要求1所述的前药化抗体，其中抗体Ab中的所述至少一个被替换的氨基酸位于所述轻链的Kabat位置67处。

6.根据权利要求1所述的前药化抗体，其中封闭部分BM是聚(乙二醇)。

7.根据权利要求5所述的前药化抗体，其中所述聚(乙二醇)的分子量为至少约2kDa。

8.根据权利要求1所述的前药化抗体，其中L中的可切割部分是可被酶切割的肽。

9.根据权利要求8所述的前药化抗体，其中所述可被酶切割的肽可被选自下组的至少一种酶切割：成纤维细胞激活蛋白(FAP)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA，尿激酶)、MT-SP1/蛋白裂解酶、豆荚蛋白和基质金属蛋白酶。

10.根据权利要求9所述的前药化抗体，其中所述酶是matriptase。

11.根据权利要求8所述的前药化抗体，其中所述可被酶切割的肽是LSGRSDNH(SEQ IDNO:5)、LSGX(SEQ ID NO:16)或LSGK(SEQ ID NO:16)。

12.根据权利要求1所述的前药化抗体，其具有根据式(IIa)至(IIh)的结构：

13.一种抗体，其在轻链的Kabat位置67处具有Cys。

14.根据权利要求13所述的抗体，其是抗CTLA4抗体。

15.根据权利要求14所述的抗体，其中所述抗CTLA4抗体具有

(a)包含SEQ ID NO:1的氨基酸31-35的重链CDR1；

(b)包含SEQ ID NO:1的氨基酸50-66的重链CDR2；

(c)包含SEQ ID NO:1的氨基酸99-107重链CDR3；

(d)包含SEQ ID NO:2的氨基酸24-35的轻链CDR1；

(e)包含SEQ ID NO:2的氨基酸51-57的轻链CDR2；和

(f)包含SEQ ID NO:2的氨基酸90-98的轻链CDR3。