[发明专利]工程改造的细胞外囊泡的亲和纯化

权利要求书

1.一种用于捕获包含至少一种Fc结合多肽的细胞外囊泡(EV)的工艺，所述工艺包含：

(i)使包含所述EV的培养基与包含Fc结构域的色谱基质接触；和

(ii)允许所述EV吸附到所述Fc结构域。

2.一种用于分离包含至少一种Fc结合多肽的EV的工艺，所述工艺包含：

(i)使包含所述EV的培养基与包含Fc结构域的色谱基质接触；

(ii)允许所述EV吸附到所述Fc结构域；以及

(ii)通过使从所述Fc结构域释放所述EV的培养基穿过所述色谱基质来洗脱所述EV。

3.根据权利要求1至2所述的工艺，其中所述Fc结构域是附接到所述色谱基质的抗体的部分。

4.根据权利要求3所述的工艺，其中所述抗体是IgG抗体。

5.根据权利要求3至4所述的工艺，其中所述抗体是人、动物或合成来源。

6.根据权利要求2至5所述的工艺，其中通过暴露具有适合的pH值的培养基触发所述EV从所述Fc结构域的释放。

7.根据权利要求6所述的工艺，其中所述pH低于8，优选地低于6，优选地低于pH 4。

8.根据前述权利要求中任一项所述的工艺，其中所述EV的所述至少一种Fc结合多肽是融合蛋白，其中所述融合蛋白包含融合到至少一种外泌体多肽的至少一种Fc结合多肽；任选地，其中所述至少一种外泌体多肽选自包含以下的群组：CD9、CD53、CD63、CD81、CD54、CD50、FLOT1、FLOT2、CD49d、CD71、CD133、CD138、CD235a、ALIX、ARRDC1、同线蛋白-1、同线蛋白-2、Lamp2b、TSPAN8、TSPAN14、CD37、CD82、CD151、CD231、CD102、NOTCH1、NOTCH2、NOTCH3、NOTCH4、DLL1、DLL4、JAG1、JAG2、CD49d/ITGA4、ITGB5、ITGB6、ITGB7、CD11a、CD11b、CD11c、CD18/ITGB2、CD41、CD49b、CD49c、CD49e、CD51、CD61、CD104、Fc受体、白介素受体、免疫球蛋白、CD2、CD3ε，CD3ζ、CD13、CD18、CD19、CD30、CD34、CD36、CD40、CD40L、CD44、CD45、CD45RA、CD47、CD86、CD110、CD111、CD115、CD117、CD125、CD135、CD184、CD200、CD279、CD273、CD274、CD362、COL6A1、AGRN、EGFR、GAPDH、GLUR2、GLUR3、HLA-DM、HSPG2、L1CAM、LAMB1、LAMC1、LFA-1、LGALS3BP、Mac-1α、Mac-1β、MFGE8、SLIT2、STX3、TCRA、TCRB、TCRD、TCRG、VTI1A、VTI1B、其他外泌体多肽及其任意组合。

9.根据前述权利要求中任一项所述的工艺，其中所述色谱基质由以下构成：琼脂糖、右旋糖酐、凝集素、肝素、纤维素、淀粉、右旋糖酐、琼脂、琼脂糖、聚(甲基)丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚砜、聚乙烯聚合物、聚苯乙烯、二氧化硅、氧化铝、氧化锆、氧化钛、多糖-矿物结构、多糖-合成聚合物、合成聚合物-矿物结构或其任意组合。

10.根据前述权利要求中任一项所述的工艺，其中所述色谱基质是珠、纤维、不规则形状的颗粒、膜、扁平结构或多孔矿物材料的形式。

11.根据前述权利要求中任一项所述的工艺，其中所述工艺在包含所述色谱基质的色谱柱中进行。

12.色谱基质用于结合EV的用途，其中所述色谱基质包含Fc结构域，并且其中所述EV包含至少一种Fc结合多肽。