[发明专利]稳定同位素标记的核酸作为内标物的核酸定量方法及其用途

权利要求书

1.一种核酸的定量分析方法，包括：

1)被¹³C和/或者¹⁵N的稳定同位元素置换的核酸(SILD)的准备阶段；

2)把所述被置换的核酸(SILD)作为内标物，往分析对象样品和对照群样品里各添加相同量的阶段；

3)从所述分析对象样品及所述对照群获得核酸的阶段；

4)把从所述3)阶段获得的核酸，以单一核苷水平加水分解的阶段；

5)在质量分析中，从所述4)阶段获得的核苷，获得与正常核苷置换的核酸(SILD)中的核苷检测值的阶段；

6)利用所述被置换核酸(SILD)中的核苷的检测值应该与分析对象和对照群样品中的一样的特性，对分析对象样品核酸的量进行归一化的阶段。

2.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述的核酸指的是DNA或者RNA，样品指的是以下物质中的至少一种以上，所述物质包括全血、血浆、血清、尿、唾液、汗、牛奶、动物提取液、植物提取液、细胞提取液、细胞培养液、饮用水、自来水、河水、江水、海水中，至少一种以上。

3.根据权利要求2所述的定量分析方法，其特征在于，所述核酸是DNA，所述样品是血清。

4.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述被置换核酸(SILD)来自于肠菌、人体、小白鼠、酵母、植物、果蝇、极小的线虫中的一种。

5.根据权利要求4所述的定量分析方法，其特征在于，所述被置换核酸(SILD)是来自大肠菌。

6.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述获得阶段为提取及精制。

7.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述加水分解是酶反应、酸处理、热处理、放射线处理、超音波处理中至少是一种。

8.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述单一核苷水平是核酸总量的99.5％以上(重量基准)被加水分解成单一核苷。

9.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述归一化阶段利用如下公式计算的核酸的定量分析方法；

在这里，核酸(分析对象)指的是分析对象样品的核酸量，核酸检测值(分析对象)指的是分析对象样品中的核酸在质量分析中的检测值，核酸(对照群)指的是对照群样品的核酸量，核酸检测值(对照群)指的是对照群核酸在质量分析中的检测值，SILD检测值(对照群)指的是对照群样品中被置换核酸(SILD)在质量分析中的检测值，SILD检测值(分析对象)指的是分析对象样品中被置换核酸(SILD)在质量分析中的检测值。