[发明专利]酸介导的分析配体-药物偶联物的测定法

权利要求书

1.一种分析样品中的配体-药物偶联物(LDC)的方法，包括以下步骤：

a.提供包含LDC的样品，其中所述LDC包含配体和分析目标，其中所述分析目标包含药物分子或其一部分；和

b.使所述样品与浓度为1-30％(v/v)的含水三氟乙酸(TFA)接触，从而诱导所述分析目标从所述LDC释放。

2.根据权利要求1所述的方法，还包括以下步骤：

a.测量从所述LDC释放的所述分析目标的量；和

b.使用释放的分析目标的量确定所述样品中所述药物分子或其部分的浓度。

3.根据权利要求2所述的方法，其中测量从所述LDC释放的所述分析目标的量的步骤包括使所述分析目标经受液相色谱-质谱法(LC-MS)。

4.根据权利要求2所述的方法，其中测量从所述LDC释放的所述分析目标的量的步骤包括使所述分析目标经受液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)。

5.根据权利要求2-4中任一项所述的方法，进一步包括以下步骤：

a.测量所述样品中配体的量；和

b.通过使用测得的配体的量确定所述样品中所述药物分子或其部分的浓度。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，进一步包括在使所述样品与含水三氟乙酸(TFA)接触的步骤之前从所述样品收集所述LDC的步骤。

7.根据权利要求6所述的方法，其中收集所述LDC的步骤通过亲和色谱、尺寸排阻色谱、硫酸铵沉淀、离子交换色谱、固定金属螯合物色谱或免疫沉淀进行。

8.根据权利要求2-7中任一项所述的方法，其中通过使用所述LDC的标准曲线执行测量从所述LDC释放的所述分析目标的量的步骤。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，进一步包括以下步骤：

a.向所述样品加入固定量的内标，其中所述内标包含配体和第二分析目标，其中所述第二分析目标是所述LDC的标记的衍生物；

b.使所述样品与浓度为1-30％(v/v)的含水三氟乙酸(TFA)接触，从而诱导所述分析目标从所述LDC释放和第二分析目标从所述内标释放；

c.测量从所述内标释放的第二分析目标的量；和

d.基于从所述内标释放的第二分析目标的量，测量从所述LDC释放的所述分析目标的量。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述第二分析目标具有与所述分析目标不同的分子量。

11.根据权利要求9-10中任一项所述的方法，其中所述内标包括所述LDC的同位素标记形式。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述同位素标记是稳定的或不稳定的。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述同位素标记是氘或碳13。

14.根据权利要求9-13中任一项所述的方法，进一步包括在使所述样品与含水三氟乙酸(TFA)接触的步骤之前从所述样品收集所述LDC和所述内标的步骤。

15.根据权利要求14所述的方法，其中收集所述LDC或所述内标的步骤通过亲和色谱、尺寸排阻色谱、硫酸铵沉淀、离子交换色谱、固定金属螯合物色谱或免疫沉淀进行。

16.根据权利要求7或15所述的方法，其中所述配体是抗体或其功能片段，并且通过使所述样品与选自蛋白A树脂、蛋白G树脂和蛋白L树脂的树脂接触，从所述样品中收集所述LDC或所述内标。