[发明专利]使用蛋白质标记物GRP78选择高效干细胞的方法

权利要求书

1.一种使用GRP78的特异性抗体或适体分离高效干细胞的方法。

2.根据权利要求1所述的方法，包括以下步骤：

(a)将GRP78特异性一抗结合至干细胞；

(b)将固定有二抗的磁珠与所述一抗结合；和

(c)使用MACS(磁激活细胞分选)分离表达GRP78的干细胞。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效干细胞在膜中表达GRP78。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(c)进一步包括去除膜中表达低水平GRP78的干细胞的步骤。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在膜中表达低水平GRP78的干细胞是衰老干细胞。

6.一种用于筛选高效干细胞的组合物，该组合物包含能够测量GRP78基因的mRNA或该基因编码的蛋白质的表达水平的试剂。

7.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，能够测量mRNA表达水平的试剂是能够扩增GRP78基因的引物或与GRP78基因特异性结合的探针。

8.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，能够测量蛋白质表达水平的试剂是GRP78基因编码的蛋白质的特异性抗体或适体。

9.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述高效干细胞是非衰老的年轻干细胞。

10.一种用于筛选高效干细胞的试剂盒，该试剂盒包含权利要求6所述的组合物。

11.根据权利要求10所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒是RT-PCR试剂盒、DNA芯片试剂盒或蛋白质芯片试剂盒。

12.一种筛选高效干细胞的方法，该方法包括以下步骤：

(a)从干细胞中提取DNA或蛋白质；

(b)测量GRP78基因的mRNA或该基因编码的蛋白质的表达水平；

(c)将测得的基因的mRNA或基因编码的蛋白质的表达水平与对照进行比较；和

(d)如果与对照相比表达水平增加，则选择干细胞作为高效干细胞。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述基因的mRNA的表达水平通过选自聚合酶链反应(PCR)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、实时PCR、RNA酶保护测定(RPA)、微阵列和核酸印记中的任一种进行测量。

14.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述蛋白质的表达水平通过选自蛋白质印迹、放射免疫测定(RIA)、放射免疫扩散、酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫沉淀、流式细胞术、免疫荧光测定、欧氏测定、补体固定测定和蛋白质芯片测定中的任何一种进行测量。

15.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述对照是衰老干细胞。

16.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述高效干细胞是非衰老的年轻干细胞。