[发明专利]使用蛋白质标记物GRP78选择高效干细胞的方法

说明书

本发明涉及使用蛋白质标记物GRP78选择高效干细胞的方法，更具体地，涉及其中仅分离高效干细胞而去除GRP78表达降低的衰老干细胞的方法。使用根据本发明的蛋白质标记物GRP78允许通过去除衰老干细胞仅高效干细胞获得分离。因此，蛋白质标记物GRP78能够用作用于控制干细胞治疗产品质量、评估其稳定性和有效性的有效指标材料，并且用于制备治疗功效优异的干细胞治疗产品。

技术领域

本发明涉及一种使用蛋白质标记物GRP78筛选高效干细胞的方法，更具体地，涉及一种去除GRP78表达降低的衰老干细胞并仅分离高效干细胞的方法。

背景技术

近年来，通过将诸如胚胎干细胞和成体干细胞之类的干细胞分化为各种细胞，已经进行了关于使用干细胞作为细胞疗法的可能性的各种研究。由于具有分化为多种细胞的能力，多能胚胎干细胞作为细胞治疗产品引起了人们的关注。然而，胚胎干细胞的使用带来了伦理问题，因此在实践中难以将这些胚胎干细胞用于细胞疗法。为了避免这些伦理问题，已经积极地进行了关于使用成体干细胞的研究(神经科学趋势“Trends inNeurosciences”23：450，2000)。

尽管成体干细胞具有缺点：当将这些细胞移植到他人时，它们具有感染风险并且具有相对较低的分化潜能，但是这些细胞具有能够大量获得和对医疗应用非常安全的优势。具体地说，即使将这些细胞移植到体内进行器官再生，它们也不会引起癌症，也不会引起免疫排斥，因为它们起源于成人。因此，这些成体干细胞可用于自体移植。此外，成体干细胞根据周围组织的特征具有位点特异性分化潜能，即使以未分化状态注射也不会引起癌症。因此，这些成体干细胞有利地具有在移植后立即产生需要细胞的潜力，并且如果需要，还具有产生和储存未分化干细胞的自我更新的潜力(JACC：转化科学基础2“JACC：Basic toTranslational Science 2”：702-716，2017)。

将干细胞开发成细胞治疗产品期间，长时间培养分离的干细胞的过程对于获得具有最佳治疗效果所需的细胞数量至关重要。由于长期培养，不可避免地在混合大量衰老细胞或混合各种传代细胞的状态下进行细胞治疗产品的开发。这可能会导致干细胞治疗产品的稳定性和有效性以及质量控制方面的问题(欧洲细胞与材料“European Cells andMaterials”31：136-159，2016)。因此，为了使用成体干细胞开发细胞治疗产品，需要筛选由于长期培养而混合的衰老细胞的方法。尽管实际上已经进行了各种努力来控制干细胞治疗产品的质量，但是建立的明确标记物仍然不足。

因此，本发明人进行了大量的工作以寻找可用于去除衰老干细胞并仅筛选高效干细胞的标记物，结果，发现在成体干细胞的长期培养中随着传代次数增加与葡萄糖代谢相关的蛋白质GRP78可以用作衰老相关的干细胞标记物，从而完成了本发明。

本背景技术部分中公开的以上信息仅用于增强对本发明背景技术的理解。因此，它可能不包含构成本发明所属领域中已知的传统技术的信息。

发明内容

本发明的目的是提供用于使用成体干细胞开发干细胞治疗产品并控制干细胞治疗产品质量的标记物GRP78。

本发明的另一个目的是提供去除衰老干细胞并分离高效干细胞以产生功效优异的干细胞治疗产品的方法。

本发明的又一个目的是提供使用蛋白质标记物GRP78筛选高效干细胞的组合物和试剂盒。

为了实现上述目的，本发明提供使用GRP78的特异性抗体或适体分离高效干细胞的方法。

本发明还提供用于筛选高效干细胞的组合物，该组合物包含能够测量GRP78基因的mRNA或该基因编码的蛋白质的表达水平的试剂。

本发明还提供用于筛选高效干细胞的试剂盒，该试剂盒包含该组合物。