[发明专利]扩增淋巴细胞的方法在审
| 申请号： | 201880079423.3 | 申请日： | 2018-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN111801415A | 公开（公告）日： | 2020-10-20 |
| 发明（设计）人： | S·波比色;A·哈拉里;G·库克斯 | 申请（专利权）人： | 路德维格癌症研究院 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 中国贸促会专利商标事务所有限公司 11038 | 代理人： | 刘晓东 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 扩增 淋巴细胞 方法 | ||
1.一种离体扩增抗原特异性淋巴细胞的方法，包括:
a)扩增获自受试者的样品中的淋巴细胞或从这样的样品分离的淋巴细胞，其中扩增包括至少两个阶段的扩增；
b)在所述至少两个扩增阶段的至少第一阶段中添加一种或多种肽，其中每种所述肽包含不同的抗原，并且其中抗原特异性淋巴细胞被扩增。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少两个阶段的扩增包括第一扩增和第二扩增。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述第二扩增在CD3复合激动剂、促细胞分裂剂或饲养细胞中的至少一种的存在下进行。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中步骤b)包括在所述至少两个阶段的扩增中的至少一个阶段期间添加两种或更多种肽，其中，每种所述肽包含不同的抗原。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中步骤b)包括在所述至少两个阶段的扩增中的至少一个阶段期间添加所述肽。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中步骤b)还包括重新添加所述肽至少一次。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中步骤b)还包括在所述第一次添加后每天重新添加所述肽。
8.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中步骤b)还包括在所述第一次添加之后每隔一天重新添加所述肽。
9.根据权利要求6至8中任一项所述的方法，其中在所述第一天之后至少两天重新添加所述肽。
10.根据权利要求2-9中任一项所述的方法，其中所述肽在所述第二扩增期间不存在。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述肽为可溶形式。
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述肽的浓度为约0.1nM至约100μM。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述肽以约1μM的浓度存在。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述肽在所述第一扩增的开始时被添加。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述肽在所述第一扩增的起始时以及隔天添加两天。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中所述肽存在于抗原呈递细胞(APC)的表面上。
17.根据权利要求16所述的方法，其中，所述样品中存在的细胞与APC的比率为约1:1至约1:100。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述比率是大约1:1。
19.根据权利要求16的方法，其中淋巴细胞与APC的比例为约0.01:1至约100:1，其中所述淋巴细胞是从样品中分离的。
20.根据权利要求19所述的方法，其中所述比率是大约1:1。
21.根据权利要求16至20中任一项所述的方法，其中在所述第一扩增的开始时添加所述APC。
22.根据权利要求16至21中任一项所述的方法，其中所述APC已经与可溶形式的所述肽一起预孵育。
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