[发明专利]具有降低的生物活性的抗体变体和同种型

权利要求书

1.抗体变体，其包含含有氨基酸序列SISPSGQSTYYRREVKG(SEQ ID NO：2)的可变区，其中

(a)在从所述序列的N末端侧起第12位的氨基酸残基R；或

(b)在从所述序列的N末端侧起第10至第12位的氨基酸残基YYR，

是缺失的，并且所述可变区在缺失位点被切割。

2.如权利要求1所述的抗体变体，其中所述序列是CDR序列。

3.如权利要求1所述的抗体变体，其中所述序列是CDR2序列。

4.如权利要求1所述的抗体变体，其中所述序列是包含在重链中的序列。

5.如权利要求1所述的抗体变体，其是双特异性抗体的变体。

6.如权利要求1所述的抗体变体，其是艾美赛珠单抗的变体。

7.权利要求1-6中任一项所述的抗体变体的检测方法，其包括通过亲和色谱、离子交换色谱、正相色谱、反相色谱、亲水相互作用色谱(HILIC)、疏水相互作用色谱(HIC)、基于电荷的分离、尺寸排阻色谱(SEC)、凝胶渗透色谱(GPC)或其组合分离含有抗体的样品的步骤，所述抗体包含含有氨基酸序列SISPSGQSTYYRREVKG (SEQ ID NO：2)的可变区。

8.如权利要求7所述的检测方法，其使用权利要求1-6中任一项所述的抗体变体作为参考标准。

9.药物组合物，其包含权利要求1-6中任一项所述的抗体变体，其中在所述药物组合物中，所述抗体变体在总抗体分子中的百分比为5％或更低。

10.如权利要求9所述的药物组合物，其中所述抗体是艾美赛珠单抗。

11.如权利要求9所述的药物组合物，其通过纯化方法获得，所述纯化方法包括通过阳离子交换色谱(CEX)纯化。

12.用于抑制权利要求1-6中任一项所述的抗体变体产生的方法，其包括在7.1或更高的pH下和/或在36℃或更低的培养温度下，培养抗体产生细胞的步骤。

13.双特异性抗体的同种型，其包含第一重链和第二重链，其中

在以下中形成二硫键：

(1a)在所述第一重链的根据EU编号的位置144的半胱氨酸和所述第二重链的根据EU编号的位置200的半胱氨酸之间；以及

(1b)在所述第一重链的根据EU编号的位置200的半胱氨酸和所述第二重链的根据EU编号的位置144的半胱氨酸之间；或其中

在以下中形成二硫键：

(2a)在所述第一重链的根据EU编号的位置226的半胱氨酸和所述第二重链的根据EU编号的位置229的半胱氨酸之间；以及

(2b)在所述第一重链的根据EU编号的位置229的半胱氨酸和所述第二重链的根据EU编号的位置226的半胱氨酸之间。

14.如权利要求13所述的双特异性抗体同种型，其中在(1a)和(1b)中形成二硫键。

15.包含第一重链和第二重链的双特异性抗体的同种型，其特征在于当使用阳离子交换色谱分离时，其在比所述双特异性抗体更接近碱性侧的区域洗脱。

16.如权利要求13-15中任一项所述的双特异性抗体同种型，其是艾美赛珠单抗的同种型。