[发明专利]具有降低的生物活性的抗体变体和同种型

说明书

作为具有比艾美赛珠单抗低的FVIII样活性的抗体变体和同种型，提供了其中在可变区中的特定氨基酸残基被切割和缺失的抗体变体(Q‑CDR‑剪切变体)，和其中重链间二硫键在温和还原条件下几乎不被还原的抗体同种型。

技术领域

本发明涉及具有降低的生物活性的抗体变体和同种型。例如，本发明涉及艾美赛珠单抗(Emicizumab)的抗体变体和同种型，所述抗体变体和同种型具有降低的凝血因子VIII(FVIII)模拟活性。本发明还涉及以低含量比率包含此类抗体变体或同种型的药物组合物。本发明进一步涉及用于检测抗体变体和同种型的方法和用于分析抗体变体和同种型的方法。

背景技术

由于抗体在血浆中高度稳定且几乎没有副作用，因此作为药物引起了人们的关注。其中，许多IgG型抗体药物可在市场上获得，并且许多抗体药物目前正在开发中(NPL 1、2和3)。

甲型血友病是由FVIII功能的遗传性降低或缺乏引起的出血异常。甲型血友病患者通常施用FVIII制剂用于出血(按需施用)。近年来，还预防性地施用FVIII制剂以预防出血事件(预防性施用；NPL 1和2)。FVIII制剂在血液中的半衰期为大约12至16小时。因此，为了持续预防，向患者每周三次施用FVIII制剂(NPL 3和4)。在按需施用中，还根据需要以一定间隔额外施用FVIII制剂以防止再出血。此外，FVIII制剂的施用是静脉内施用。因此，强烈需要与FVIII制剂相比具有更轻的施用负担的药剂。

偶尔，血友病患者中会产生针对FVIII的抗体(抑制剂)。这种抑制剂抵消了FVIII制剂的作用。对于已经产生了抑制剂的患者(抑制剂患者)的出血，可施用旁路剂。它们的作用机制不依赖于FVIII功能，即，通过活化的凝血因子IX(FIXa)催化凝血因子X(FX)活化的功能。因此，在一些情况下，旁路剂不能充分地阻止出血。因此，强烈需要不受抑制剂存在影响且在功能上替代FVIII的药剂。

作为解决该问题的手段，已经报道了功能上替代FVIII的双特异性抗体及其用途(PTL 1、2、3和4)。通过将两个因子彼此靠近放置以展示FVIII模拟活性，针对FIXa和FX的双特异性抗体能够在功能上取代FVIII(NPL5)。据报道，通过优化对FIXa和FX的亲和力，可增强抗体的FVIII模拟活性(NPL 6)。据报道，具有高FVIII模拟活性的艾美赛珠单抗(ACE910)(其是这些抗体之一)在血友病的猴模型中发挥止血效果(NPL 7和8)；因此，正在对甲型血友病患者进行临床试验。

文献列表

[专利文献]

[PTL 1]WO 2005/035754

[PTL 2]WO 2005/035756

[PTL 3]WO 2006/109592

[PTL 4]WO 2012/067176

[非专利文献]

[NPL 1]Blood 58，1-13(1981)

[NPL 2]Nature 312，330-337(1984)

[NPL3]Nature 312，337-342(1984)

[NPL 4]Biochim.Biophys.Acta 871，268-278(1986)

[NPL 5]Nat Med.2012年10月；18(10)：1570-4.

[NPL 6]PLoS One.2013；8(2)：e57479.

[NPL 7]J ThrombHaemost.2014年2月；12(2)：206-213.

[NPL 8]Blood.2014年11月13日；124(20)：3165-71.