[发明专利]具有对FcRn的亲和力提高以及对至少一个Fc片段受体的亲和力提高的Fc片段的变体

说明书

本发明涉及包含Fc片段的亲本多肽的变体，所述变体相对于亲本多肽，对FcRn受体的亲和力提高以及对选自FcγRI(CD64)、FcγRIIIa(CD16a)和FcγRIla(CD32a)受体的至少一个Fc受体(FcR)的亲和力提高，所述变体的特征在于其包含：(i)四个突变334N、352S、378V和397M；和(ii)至少一个选自434Y、434S、226G、P228L、P228R、230S、230T、230L、241L、264E、307P、315D、330V、362R、389T和389K的突变；其中编号是EU索引或Kabat等价的编号。

本发明涉及包含突变的Fc区并相对于亲本多肽对FcRn受体亲和力提高以及对至少一个Fc受体(FcR)的亲和力提高的多肽(也称为变体)。

抗体由重链和轻链的四聚体组成。两条轻链彼此相同，同时两条重链相同并且由二硫键连接。存在五种类型的重链(α、γ、δ、ε、μ)，其决定了免疫球蛋白类型(IgA、IgG、IgD、IgE、IgM)。轻链组包括两个亚组，λ和κ。

IgG是可以在血液和其他体液中发现的可溶性抗体。IgG是Y-形糖蛋白，具有大约150kDa的分子量，由两条重链和两条轻链组成。每条链由恒定区和可变区组成。重链的两个羧基末端结构域形成Fc片段，而重链和轻链的氨基末端结构域识别抗原并且被称为Fab片段。

通过抗体Fc片段与提供对给定的治疗靶标的特异性的蛋白质结构域的结合形成Fc融合蛋白。实例是Fc片段与任何类型的治疗性蛋白或其片段的结合。

Fc多肽，特别是Fc片段，治疗性抗体和Fc融合蛋白，目前用于治疗各种疾病，如类风湿性关节炎、牛皮癣、多发性硬化和许多形式的癌症。治疗性抗体可以是单克隆或多克隆抗体。单克隆抗体获自单个抗体产生细胞系，其显示出对单个抗原的相同特异性。作为对抗自身免疫疾病和/或炎性组分的药物来使用或研发治疗性Fc融合蛋白，所述药物如依那西普(etanercept)(Amgen's Enbrel，其是结合FC的TNF受体)或阿列法西普(Alefacept)(Biogen Idec's Amevive，其是结合人IgG1的Fc部分的LFA-3)。

Fc多肽，如Fc片段，Fc抗体和融合蛋白特别地具有取决于Fc部分与其受体的结合的活性，即，FcRn和Fc片段受体(FcR)，如Fc cγRI(CD64)、FcγRIIIa(CD16a)和FcγRIla(CD32a)受体。

在涉及Fc多肽与Fc片段受体(FcR)相互作用的疗法中，期望的作用之一是通过结合效应细胞表面上的Fc受体来抑制免疫系统激活。特别是在涉及自身抗体和/或细胞因子的炎性和/或自身免疫性疾病的治疗中，基于Fc的疗法可以通过阻断Fc受体从而与自身抗体竞争进入这些受体来起作用。这导致通常由自身抗体介导的直接活性(例如抗体依赖性细胞毒性、补体依赖性细胞毒性或抗体依赖性细胞吞噬作用)的抑制，以及免疫系统的激活降低，包括细胞因子释放。另外，由于FcRn受体参与抗体的再循环，因此用Fc多肽阻断它们可以更快地消除自身抗体，从而降低其半衰期。这就是为什么基于Fc片段的治疗特别适合由免疫系统细胞不受控制的刺激(尤其是自身抗体和/或细胞因子)触发的自身免疫和/或炎性疾病的原因。

提议用于这些疾病治疗的基本疗法是静脉内免疫球蛋白(IVIG或IVIg)疗法，该疗法包括向患者静脉内施用来自人血浆捐赠池的免疫球蛋白(最常见是IgG)。通常认为这些IgG特别是通过阻断Fc受体并因此与自身抗体竞争进入这些受体而起作用。最近，已研发出Fc片段，用于修饰其Fc受体结合特性的目的。然而，它们的有效性仍有待证明。

仍然需要优化这些Fc片段，特别是提高其半衰期和/或其治疗功效。

申请人现在已研发出呈现提高的活性的特定Fc片段，特别是通过提高的FcRn结合亲和力。这些Fc片段可用于治疗，并且特别适合炎性和/或自身免疫疾病的治疗，以便为包含它们的产品带来更大的功效。

特别地，这些片段可以呈现出更有效的对免疫系统细胞上存在的Fc受体的阻断，然后其较少的或不再可用于自身抗体的结合，然后其活性被抑制。