[发明专利]用于诱导从体细胞到诱导性多能干细胞的脱分化的来源于胎盘的细胞条件培养基及利用其的脱分化诱导方法

权利要求书

1.来源于胎盘的细胞条件培养基用于诱导经编码选自由OCT4、SOX2、c-Myc及KLF4组成的组中的全部蛋白质的核酸序列转化的体细胞到诱导性多能干细胞的脱分化的用途，

其中所述来源于胎盘的细胞条件培养基通过包括下列步骤的方法制备：

在添加培养液的细胞生长培养基中培养来源于人胎盘的细胞；以及

从细胞生长培养基中回收含有来源于人胎盘的细胞培养物的培养液，

其中所述来源于胎盘的细胞为从人绒毛膜板中分离并培养的来源于胎盘的纤维细胞样细胞，且

其中所述体细胞为选自由内皮细胞、上皮细胞及胎盘细胞组成的组中的一种以上。

2.一种从体细胞到诱导性多能干细胞的脱分化诱导方法，其包括：

体细胞转化步骤，向体细胞转导用于编码选自由OCT4、SOX2、c-Myc及KLF4组成的组中的全部蛋白质的核酸序列；以及

体细胞培养步骤，在来源于胎盘的细胞条件培养基中培养经转化的体细胞，

其中所述来源于胎盘的细胞条件培养基通过包括下列步骤的方法制备：

在添加培养液的细胞生长培养基中培养来源于人胎盘的细胞；以及

从细胞生长培养基中回收含有来源于人胎盘的细胞培养物的培养液，

其中所述来源于胎盘的细胞为从人绒毛膜板中分离并培养的来源于胎盘的纤维细胞样细胞，且

其中所述体细胞为选自由内皮细胞、上皮细胞及胎盘细胞组成的组中的一种以上。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述脱分化诱导方法还包括从在体细胞培养步骤中形成的集落中分离干细胞的干细胞分离步骤。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述干细胞分离步骤通过利用干细胞标记物进行染色来执行。

5.根据权利要求3所述的方法，其中所述脱分化诱导方法还包括在从集落中分离的干细胞中对选自由OCT-4、NANOG、SSEA-4及Tra-81组成的组中的一种以上的蛋白质的活性进行确认的干细胞活性验证步骤。

6.根据权利要求3所述的方法，其中所述脱分化诱导方法还包括通过利用从集落中分离的干细胞在生物体外形成胚芽口来确认分化为外胚层、中胚层或内胚层的分化能力的干细胞分化能力验证步骤。