[发明专利]配子发生

权利要求书

1.一种生成减数分裂胜任细胞的活体外方法，所述方法包括：

(i)提供前体细胞，

(ii)抑制所述前体细胞的基因组DNA的甲基化，

(iii)用多梳蛋白抑制复合物的抑制剂处理所述前体细胞，且随后

(iv)使所述前体细胞在一段时间内且在适合于所述前体细胞变为减数分裂胜任细胞的培养条件下繁殖；

其中步骤(ii)和步骤(iii)可以同时或按任一次序依序进行。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述前体细胞是来源于已从个体获得的样本。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述前体细胞是干细胞或原始生殖细胞样细胞(PGCLC)。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述干细胞是iPS细胞。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述前体细胞表达Tetl，或在步骤(i)和/或(ii)之后开始表达Tetl。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述抑制步骤(ii)和所述处理步骤(iii)足以诱导所述前体细胞在繁殖步骤(iv)期间表达生殖系再程序化应答(GRR)基因。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述GRR基因的所述表达与转录活化因子的募集相关或通过转录活化因子的募集诱导。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述转录活化因子是Tetl。

9.根据权利要求5或权利要求8所述的方法，其中外源地提供或增强Tetl表达。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤(iv)之前或在步骤(iv)期间，将Tetl蛋白外源地引入到所述前体细胞中。

11.根据权利要求9或权利要求10所述的方法，其中所述外源提供或外源引入的Tetl是靶向一个或多个特定基因组区域的Tetl融合构建体。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其进一步包括：

(v)检测所述细胞中的一个或多个GRR基因的表达水平。

13.根据权利要求12所述的方法，其中步骤(v)是在步骤(iv)后在所述减数分裂胜任细胞上进行。

14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中多梳蛋白抑制复合物的所述抑制剂是PRC1抑制剂和/或PRC2抑制剂。

15.根据权利要求14所述的方法，其中多梳蛋白抑制复合物的所述抑制剂是PRC1抑制剂。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述PRC1抑制剂是PRT4165。

17.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中多梳蛋白抑制复合物的所述抑制剂是RNAi分子。

18.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤(ii)是通过用降低基因组DNA甲基化的药剂处理所述前体细胞来进行。

19.根据权利要求18所述的方法，其中降低基因组DNA甲基化的所述药剂是DNA甲基转移酶抑制剂、阻止DNA甲基化沉积的药剂或抑制DNA甲基化的维持的药剂。

20.根据权利要求19所述的方法，其中降低基因组DNA甲基化的所述药剂是DNA甲基转移酶抑制剂。