[发明专利]活体外诱导成体干细胞增殖及分化

说明书

本发明大体上是关于一种用于诱导成体干细胞(ASC)活体外增殖及/或分化的组合物及其使用方法，其使用miR‑302类pre‑miRNA、shRNA及/或siRNA，其皆在5'‑末端中含有5'‑UAAGUGCUUC CAUGUUU‑3'的共用序列，且进一步结合使用一些伤口愈合相关定义因子，包括但不限于碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)/纤维母细胞生长因子2(FGF‑2)、白血病抑制因子(LIF)、似胰岛素生长因子(IGF)、表皮生长因子(EGF)、血小板衍生的生长因子(PDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转型生长因子(TGF)、肿瘤坏死因子(TNF)、干细胞因子(SCF)、同源盒蛋白质(HOX)、Notch、GSK、Wnt/β‑连环蛋白信号、介白素及/或骨成形性蛋白质(BMP)。本发明的原理与近年来在活体内皮肤伤口愈合模型中发现的新颖的诱导性对称成体干细胞分裂机制有关。所得扩增的成体干细胞可用于治疗多种与人类衰老和细胞功能障碍相关的疾病，包含但不限于阿兹海默症、帕金森氏症、运动神经元疾病、中风、糖尿病、骨质疏松症、心肌梗塞、血友病、贫血症、AIDS、白血病、淋巴瘤及许多类型的癌症及老化疾病。

优先权：

本发明主张于2018年7月2日提交的美国临时申请案，申请号No.62/692,862 的优先权，其标题为“体外诱导CD34阳性成体干细胞增殖”，其全部公开内容通过引用并入于此。

技术领域

本发明大体上是关于一种诱导成体干细胞(ASC)活体外增殖及/或分化的组合物及其使用方法，其使用某些较小非编码RNA(snRNA)以及一些定义蛋白因子，包括小发夹样RNA(shRNA)、microRNA前驱物(pre-miRNA)及/或短干扰RNA(siRNA)以及由以下组成的一或多个定义因子：碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)/纤维母细胞生长因子2(FGF-2)、白血病抑制因子(LIF)、似胰岛素生长因子(IGF)、表皮生长因子(EGF)、血小板分化的生长因子(PDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转型生长因子(TGF)、肿瘤坏死因子(TNF)、干细胞因子(SCF)、同源盒蛋白质(HOX)、 Notch、GSK、Wnt/β-连环蛋白信号、介白素及/或骨成形性蛋白质(BMP)。具体而言，本发明是关于一种诱导CD34+成体干细胞(CD34+ASC)活体外增殖及/或分化的组合物及其使用方法，其使用miR-302模拟shRNA、pre-miRNA 及/或siRNA，含有与5'-UAAGUGCUUC CAUGUUU-3'同源的共用序列，且进一步结合使用选自以下的一或多个定义因子：bFGF/FGF-2、LIF、IGF、EGF、 PDGF、VEGF、TGF、TNF、SCF、HOX、Notch、GSK、Wnt/β-连环蛋白、介白素及/或BMP。诱导成体干细胞增殖及分化的原理与近年来在皮肤伤口愈合活体内模型中发现的新颖的诱导性对称成体干细胞分裂机制有关。所得扩增的成体干细胞适用于治疗多种人类衰老相关病症及细胞功能障碍相关病症，包含但不限于阿兹海默症(Alzheimer's disease)、帕金森氏症 (Parkinson's disease)、运动神经元疾病、中风、糖尿病、骨质疏松症、心肌梗塞、血友病、贫血症、艾滋病(AIDS)、白血病、淋巴瘤及许多类型的癌症。值得注意地，本发明亦适用于由向身体供应无限扩增的自身成体干细胞，以便活体内修复及再生受损及/或衰老组织及器官来预防衰老以及治疗衰老相关的退行性不适。

背景技术

干细胞类似于含有众多有效成分的生命百宝箱，其适用于刺激新细胞及组织再生、修复及/或再生受损/老化组织、治疗退行性疾病及预防肿瘤/癌症形成及进展。因此，可设想，我们可使用此等干细胞作为新颖药物筛检、鉴别、分离及制造的工具。因此，由此获得的药物可适用于开发医药及治疗应用，诸如用于研究、诊断及/或疗法使用的生物医学利用、装置及/或设备及其组合。