[发明专利]一种用于肿瘤光热治疗联合免疫治疗的抗体偶联硒化铋纳米颗粒及其制备方法

说明书

一种用于肿瘤光热治疗联合免疫治疗的抗体偶联硒化铋纳米颗粒及其制备方法，属于药物制剂领域。该抗体偶联硒化铋纳米颗粒以氨基化的硒化铋为载体，PEG为交联剂，将抗CD47抗体偶联于纳米颗粒表面。在静脉注射该抗体偶联硒化铋纳米粒悬液后，纳米粒会通过EPR效应大量靶向聚集在肿瘤部位，避免了单独抗CD47抗体全身给药而引起的贫血。同时，表面修饰的抗CD47抗体与肿瘤细胞表面高表达的CD47分子特异性识别，封闭CD47与SIRPα信号通路，从而使巨噬细胞重新获得吞噬肿瘤细胞的能力。特别是在光热治疗后，残余的肿瘤细胞会因为“不吃我”信号通路被封闭而被巨噬细胞清除，达到彻底根除肿瘤的目的。本发明方法设计合理，制备工艺简单，具有广阔的应用前景，同时也为相应给药系统的设计和发展打下基础。

技术领域

本发明属于药物制剂领域，涉及一种用于肿瘤光热治疗联合免疫治疗的抗体偶联硒化铋纳米颗粒及其制备方法，具体涉及一种利用近红外激光和抗CD47抗体实现肿瘤的光热治疗联合免疫治疗的硒化铋纳米粒及其制备方法。

技术背景

过去几百年来，癌症是严重威胁人类健康和生命的疾病之一。据有关数据显示，我国居民恶性肿瘤死亡率比70年代中期增加了83.1％。目前，肿瘤治疗的主要三种治疗方法包括外科切除、放射治疗和化学治疗。但是上述方法对正常组织会造成附带损害和严重毒性，治疗效果不甚理想。光热疗法(PTT)作为一种光触发的非侵入性治疗策略，可以选择性高效杀死肿瘤细胞，近年来受到了极大的关注。该方法采用对组织穿透力较强的近红外光(NIR) 辐射肿瘤组织，在光热转换试剂的作用下,将激光能量转换为局部热量使肿瘤组织温度升高，从而达到杀伤肿瘤细胞的目的。但是有些肿瘤体积过大，处在照射边缘的肿瘤组织很难被完全消融，导致光热治疗后肿瘤易复发。因此，单一的光热治疗不足以彻底根除肿瘤，有必要联合其他手段共同对抗肿瘤来提高疗效。

癌症免疫治疗方兴未艾。巨噬细胞在人体的免疫活动中起着极其重要的作用，在肿瘤组织中，肿瘤相关巨噬细胞更是占肿瘤浸润免疫细胞的很大一部分。但如此数量庞大的巨噬细胞却没有发挥他们的吞噬作用。其中一个重要的原因是大部分肿瘤细胞表面都高表达CD47。 CD47又称整联蛋白相关蛋白，其配体为巨噬细胞表面的信号调节蛋白α链(SIRPα)。肿瘤细胞与巨噬细胞形成CD47-SIRPα信号复合体可引起巨噬细胞表面SIRPα的胞内结构域中免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)发生磷酸化，传导抑制性信号即“不吃我”信号而降低巨噬细胞的吞噬活性，从而促进肿瘤细胞的免疫逃逸。目前，已经有三种针对CD47的拮抗剂已经进入一期临床试验。虽然在肿瘤细胞表面都高表达CD47，但是在人体一些其他细胞上，例如红细胞，表面也普遍表达CD47，全身给予这些拮抗剂会引起严重贫血。因此，如何将CD47 拮抗剂靶向递送至肿瘤部位从而减轻贫血反应是亟待解决的难题。

因此，开发新型的多功能纳米制剂用于肿瘤光热治疗和靶向CD47的免疫治疗是非常有必要的。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明提供一种光热治疗联合阻断CD47免疫检查点的硒化铋纳米组合物及其制备方法。

本发明采用的技术方案为：

一种用于肿瘤光热治疗联合免疫治疗的抗体偶联硒化铋纳米颗粒，该抗体偶联硒化铋纳米颗粒以氨基化的硒化铋为载体，PEG为交联剂，将抗CD47抗体偶联于纳米颗粒表面。在静脉注射该抗体偶联硒化铋纳米粒悬液后，纳米粒会通过EPR效应大量靶向聚集在肿瘤部位，避免了单独抗CD47抗体全身给药而引起的贫血。同时，表面修饰的抗CD47抗体与肿瘤细胞表面高表达的CD47分子特异性识别，封闭CD47与SIRPα信号通路，从而使巨噬细胞重新获得吞噬肿瘤细胞的能力。特别是在光热治疗后，残余的肿瘤细胞会因为“不吃我”信号通路被封闭而被巨噬细胞清除，达到彻底根除肿瘤的目的。

一种用于肿瘤光热治疗联合免疫治疗的抗体偶联硒化铋纳米颗粒的制备方法，包括以下步骤：

第一步，合成硒化铋纳米颗粒