[发明专利]一种JMH血型抗原芯片及其在红细胞意外抗体检测中的应用在审
申请号: | 201910003164.2 | 申请日: | 2019-01-03 |
公开(公告)号: | CN109725144A | 公开(公告)日: | 2019-05-07 |
发明(设计)人: | 于晓波;汪德清;杨璐 | 申请(专利权)人: | 北京蛋白质组研究中心 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N33/531 |
代理公司: | 北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11690 | 代理人: | 张丹 |
地址: | 102206 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 红细胞 血型抗原 抗体检测 芯片 标记物 抗原 包被 抗体 高通量检测 检测样品 结果判读 特异性强 稀有血型 信号检测 灵敏度 检测 二抗 应用 核对 细胞 | ||
1.一种血型抗原芯片,包括纯化血型抗原和载体,所述的纯化血型抗原包被至所述的载体上;所述的载体为微球,所述的微球选自二氧化硅微球、聚苯乙烯微球、磁性微球和生物大分子聚合物微球中的一种或两种以上的组合。
2.根据权利要求1所述的血型抗原芯片,其特征在于,所述纯化血型抗原为JMH。
3.根据权利要求1所述的血型抗原芯片,其特征在于,所述的纯化血型抗原包被至载体的量为1-200μg/1.25×107个微球。
4.一种权利要求1-3任一所述的血型抗原芯片的制备方法,包括如下步骤:
(1)微球的预处理:将微球超声重悬;
(2)微球的活化:将微球依次加入N-羟基硫代琥珀酰亚胺、碳二亚胺活化;
(3)向微球溶液中加入纯化血型抗原进行偶联,所述的纯化血型抗原能够结合红细胞意外抗体。
5.一种权利要求1-3任一所述的血型抗原芯片在如下用途中的应用:(1)红细胞意外抗体的筛查及鉴定;(2)红细胞意外抗体的定量检测;(3)输血配型。
6.一种用权利要求1-3任一所述的血型抗原芯片进行血型抗体的鉴定或检测方法,包括:
(1)将纯化血型抗原包被至载体,所述的纯化血型抗原能够结合红细胞意外抗体;
(2)使检测样品与包被至载体的抗原孵育;
(3)加入标记有标记物的二抗;
(4)针对标记物进行信号检测。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述的检测样品为全血、血清、血浆或抗体,所述检测样品稀释后再与包被至载体的抗原接触,稀释倍数为25-200倍。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中检测样品与包被至载体的抗原孵育的时间为15-60min。
9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述的标记有标记物的二抗选自标记有荧光素或酶的蛋白或抗体及其偶联物;所述蛋白或抗体及其偶联物选自亲和素、链霉亲和素、地高辛抗体、组氨酸抗体、含Ni亲和分子、荧光分子抗体;所述的荧光素选自花青素Cy系列荧光素、Alexa Fluor系列荧光素或异硫氰酸荧光素;所述的酶为碱性磷酸酶或过氧化物酶;所述二抗的加入浓度为1-8ug/ml。
10.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述的信号检测包括荧光法检测、显色法检测、电化学检测、力学检测。
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