[发明专利]一种高纯度、高溶解性、高活性的食用菌多糖制备方法

说明书

本发明提供了一种高纯度、高溶解性、高活性的食用菌多糖制备方法，该方法包括将食用菌干燥粉碎后放入⁶⁰Co辐照装置中进行γ射线处理，然后加水进行复合酶酶解、超高速剪切‑超声一体化处理后，除去不溶物得提取液；提取液浓缩后加入无水乙醇，充分搅拌后静置、离心，所得沉淀物经洗涤、干燥即得。相对于传统的热水浸提法以及不辐照处理，本发明方法显著提高了多糖的溶出率、纯度和溶解性，并且经过辐照菇粉提取的多糖生物活性也得到了较大的提高。

技术领域

本发明属于食用菌深加工技术领域，具体而言，涉及一种高纯度、高溶解性、高活性的食用菌多糖提取制备方法。

背景技术

食用菌多糖是一类从食用菌子实体、菌丝体或发酵液中分离的并由10个以上的单糖以糖苷键形式连接而成的天然高分子化合物。研究表明，食用菌多糖具有调节机体免疫功能、抗肿瘤、抗菌、降血脂、降血糖、抗炎、护肝、抗疲劳和抗衰老等功效，目前已经广泛应用于保健食品和药品中。

传统的食用菌多糖制备方法主要采用热水浸提法、酸浸提法、碱浸提法提取等，这些方法制备的食用菌多糖提取率比较低，而且提取的多糖样品中杂质多，纯度不到30％；另外，这些方法需要长时间高温处理，会影响多糖的活性。除此之外，现有方法获得的多糖因分子量较大，易形成黏度高、溶解度低的复合物，限制了在生物体内的扩散和吸收，影响其临床应用效果，既而限制了多糖的应用。

多糖的分子修饰是运用物理、化学、生物等方法对其主链或侧链的某些特殊结构或功能基团进行修饰，使多糖的某些物理化学性质和空间结构发生改变，从而提高其生物学活性的方法。目前应用较多的修饰方法主要包括羧甲基化修饰、硫酸化修饰、硒化修饰、磷酸化修饰以及辐照修饰等。多糖的辐照修饰是对多糖进行电离辐射，引发多糖分子的电离和激发，发生辐照交联或辐照断裂，从而改变多糖的物理和化学性能，包括分子量、聚合度、分子结构、分子基团组成等。与化学修饰方法相比，辐照改性具有不需要添加催化剂、反应程序可控等优点，因此可用辐照修饰法对食用菌多糖进行修饰。

目前，多糖辐照修饰主要是将提取好的食用菌多糖进行辐照处理，这种处理也可以降低多糖分子量、增加多糖的溶解性，但对多糖的生物活性影响较大，部分多糖经过辐照处理，生物活性会完全丧失。因此，在辐照处理获得低分子量、高溶解性多糖的同时又不损失多糖的生物活性成为了一个技术难题。

发明内容

为了克服上述现有技术的不足，本发明提供了一种适用于多种食用菌多糖的提取方法，采用该方法提取的食用菌多糖具有高纯度、高溶解性和高生物活性，非常适合应用于保健食品和药品中。

为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验研究并不懈探索，最终结合γ射线(⁶⁰Co)辐照改性、生物酶复合酶解、超高速剪切处理等手段，大大提高食用菌多糖的溶出率和纯度，制备的多糖水溶性好，生物活性高。具体地，本发明的技术方案概况如下：

一种高纯度、高溶解性、高活性的食用菌多糖制备方法，该方法包括如下步骤：

(1)将食用菌原料干燥、粉碎并过筛，所得料粉放入⁶⁰Co辐照装置中进行γ射线处理，辐照强度为4～20kGy；

(2)取辐照后的料粉，加入10～30倍量的水浸泡，使粉末充分吸水膨胀，调节pH值为5.8～6.2，加入复合酶，酶的用量为每千克原料加入木瓜蛋白酶100～400万U、纤维素酶4.5～30万U及果胶酶10～50万U，36～37℃条件下酶解3～5h；

(3)将酶解液置于超高速剪切-超声一体制备装置中，设置剪切刀头转速8000～12000r/min，超声功率为300～350W，提取温度为75～90℃，处理时间为8～20min；

(4)超高速剪切处理后过滤，上清液保留，滤渣中加入10～30倍量的水重复步骤(3)后取上清，重复1～3次，合并上清液；

(5)将上清液浓缩后，加入无水乙醇至终浓度为60～80％，3～5℃静置过夜；